本文采用了亲水相互作用色谱法对细胞糖代谢过程中产生的十一种化合物6-磷酸葡萄糖、6-磷酸果糖、5-磷酸核糖、1,6-二磷酸果糖、葡萄糖、磷烯醇丙酮酸、丙酮酸、乳酸、柠檬酸、丝氨酸进行了分析,并考察了不同的亲水相互作用色谱柱、洗脱条件、检测器对其分离的影响。研究中发现亲水相互作用色谱柱ZIC-HILIC柱比Phenomenex luna NH2柱和Venusil XBP silica柱有更好的保留与分离效果。高浓度的缓冲盐和高比例的有机相有利于它们在ZIC-HILIC柱上保留,但起始梯度中含有高比例的有机相,不利于这十一个化合物的分离与检测;当水相和有机相的比例达到40:60时十一个化合物可以被完全洗脱;降低水相比例的升高速率有助于对十一个化合物的分离。十一个化合物均能够被电雾式检测器检测到;紫外检测器在220nm波长下只能检测到丙酮酸和磷酸烯醇式丙酮酸;而蒸发光散射检测器可以检测到除丙酮酸以外的十个化合物。本文还用液相色谱电喷雾质谱联用仪对十一种标准品混合样的各色谱峰进行定性,确定各标准品分子离子峰的质荷比。并对白血病细胞提取物进行检测,发现其含有6-磷酸果糖,1,6-二磷酸果糖和乳酸,其中乳酸含量明显高于其...
【英文摘要】
The reserach work is to establish a method to analyze the products of glucose metabolism:glucose-6-phosphate, fiructose-6-phosphate, ribose-5-phosphate, fructose-1,6-diphosphate, glucose, phosphoenolpyruvic acid, pyruvic acid, lactic acid, citric acid, and serine which may be generated in the cell during the glucose metabolism process. HILIC column ZIC-HILIC is better in retention and separation effect than Phenomenex luna NH2 column and Venusil XBP silica column. High concentration of buffer salt and high ...