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固氮施氏假单胞菌RNA分子伴侣蛋白Hfq的功能鉴定及表达特性研究  
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【英文题名】 Functional Characterization And Regulation of The RNA Chaperone Hfq in The Nitrogen-fixing Pseudomonas Stutzeri A1501
【作者】 王巍;
【导师】 林敏; 侯明生; 燕永亮; 战嵛华;
【学位授予单位】 华中农业大学;
【学科专业名称】 植物病理学
【学位年度】 2015
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 华中农业大学
【网络出版投稿时间】 2015-08-11
【关键词】 施氏假单胞菌A1501; RNA分子伴侣Hfq; RpoS; 氧化胁迫; 渗透胁迫; 固氮调控;
【英文关键词】 Pseudomonas stutzeri A1501; RNA chaperone Hfq; RpoS; Oxidative stress; Osmotic stress; Nitrogen Regulation;
【中文摘要】 RNA分子伴侣蛋白Hfq,能够促进蛋白或者非编码RNA与靶标m RNA的互作,调控m RNA的稳定性进而参与细胞内众多代谢过程。已有研究表明Hfq能够影响固氮微生物-植物互作及固氮效率,但其在联合固氮菌中的具体功能未见报道。联合固氮施氏假单胞菌A1501中存在Hfq同源蛋白,本研究通过构建突变株、测定生理生化表型、表达纯化目的蛋白并进行凝胶阻滞实验,对Hfq的功能及表达特性进行研究。取得了以下结果:1、在P.stutzeri A1501中存在高度保守的Hfq同源蛋白,为了研究其功能,构建了hfq基因的非极性突变株,生长曲线测定结果表明hfq突变并不影响菌株在LB丰富性培养基和K限制性培养基中的生长能力,但对氧化胁迫(18mmol/L H2O2处理10min)及渗透胁迫(0.3mol/L山梨醇处理1h)的抵抗能力降低,实时定量(Real-time PCR)结果表明hfq突变后,烷基过氧化氢酶编码基因ahp FC、过氧化氢酶编码基因kat ABEG以及谷胱甘肽过氧化物酶编码基因的表达量均显著下调。这与大多数已报道的hfq突变株的结果一致。此外,hfq突变后,该菌形成生物膜的能力增强,以亚硝酸盐为电子受体的反硝化能...
【英文摘要】 RNA chaperone Hfq which encoded by hfq gene is involved in many intracellular metabolic processes by promoting the interaction between protein or non-coding RNA and target m RNA, regulating the stability of m RNAs. Previous studies indicated that Hfq could affect nitrogen fixation efficiency and the interaction between nitrogen-fixing microbes and plants. Pseudomonas stutzeri A1501 has a Hfq homologous protein, a hfq mutant was constructed and used to detect physiological and biochemical traits, express and...
【更新日期】 2016-03-15

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