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参环毛蚓体外细胞培养的研究  
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【英文题名】 Studies on in Vitro Cell Culture of Pheretima Aspergillum
【作者】 侯雪芹;
【导师】 李薇;
【学位授予单位】 广州中医药大学;
【学科专业名称】 中药学
【学位年度】 2012
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 广州中医药大学
【网络出版投稿时间】 2014-10-27
【基金】 国家自然科学;
【关键词】 参环毛蚓; 细胞培养; DNA条形码; 同工酶; CAKP酶;
【英文关键词】 Pheretima aspergillum (E.Perrier); cell culture; DNA barcoding; isoenzyme; CAKP enzyme;
【中文摘要】 [目的] 建立一种快速、有效分离广地龙(参环毛蚓)体细胞的方法。通过筛选和优化广地龙细胞培养的条件,获得稳定的参环毛蚓体细胞模型,为广地龙重金属富集机制的研究提供一致性高、稳定性好的无菌细胞群体,从而在细胞和分子水平上解释其重金属富集机制的研究。 [方法] 1.提取参环毛蚓8个解剖部位的细胞进行体外存活对比,根据组织特征采用酶消化法和组织块培养法进行研究；应用酶消化法研究了参环毛蚓的体壁、肠道、嗉囊、前列腺等组织细胞；组织块法用于参环毛蚓的储精囊和受精囊组织培养；根据培养前后细胞形态变化和增殖能力的差异,筛选出适合进行细胞培养的解剖部位。 2.在前人研究的基础上,根据参环毛蚓肠上皮细胞的生物学特征,对原代培养体系进行了系统的筛选和优化,包括培养基种类、血清浓度、消化酶种类等方面的研究,建立了稳定的参环毛蚓培养体系。 3.利用MTT法测定参环毛蚓肠细胞生长曲线,确立了参环毛蚓肠上皮细胞稳定生长的指数期范围；采用培养法和PCR扩增法对细胞质量进行检测。 4.采用种属、组织来源及专属检测酶鉴定法对细胞系进行系统鉴定。种属鉴定通过对1、5、7代细胞提取基因组,采用PCR...
【英文摘要】 Objective: The aim of the study was to explore a rapid and efficacious approach for the successful isolation of intestinal epithelium cells (IEC) from Pheretima aspergillum (E. Perrier). The culturing condition was optimized and the stable cell line of P. aspergillum was thus obtained. The work present here in had established a homogenous and stable sterile cell line of P. aspergillum, which might contribute to illuminate the heavy metal enrichment of P. aspergillum and its underlying mechanism at both ...
【更新日期】 2015-02-25

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导师：李薇    导师单位：广州中医药大学    学位授予单位：广州中医药大学
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