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嗜热微生物来源的α-半乳糖苷酶的基因克隆和性质研究  
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【英文题名】 Gene Cloning and Characterization of α-Galactosidases from Thermophilic Microorganisms
【作者】 王慧敏;
【导师】 姚斌;
【学位授予单位】 中国农业科学院;
【学科专业名称】 生物化学与分子生物学
【学位年度】 2014
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 中国农业科学院
【网络出版投稿时间】 2014-07-09
【关键词】 嗜热微生物; α-半乳糖苷酶; 基因克隆; 异源表达; 酶学性质研究;
【英文关键词】 Thermophilic microorganism; α-Galactosidase; Gene cloning; Heterogeneous expression; Biochemical characterization;
【中文摘要】 α-半乳糖苷酶可以专一性催化α-半乳糖苷键的断裂，并具有转糖苷的作用，因此在饲料、医疗、食品及化工等行业有广泛的应用。在饲料工业中，以豆粕为主要蛋白原料的饲料中添加α-半乳糖苷酶可以有效降解α-半乳糖苷寡糖类抗营养因子，减少动物肠胃疾病的发生。由于α-半乳糖苷酶的生产成本高、产量低，并且在饲料加工不可避免的高温过程中易失活，其广泛应用受到了限制。本研究旨在从嗜热微生物中获取新颖的α-半乳糖苷酶基因，构建高效表达和分泌的基因工程菌株，为工业应用提供酶学性质优良、高产低廉的α-半乳糖苷酶。 本实验室保存的嗜热萨托菌(Neosartorya fischeri P1)、嗜热篮状菌(Talaromyces leycettanusJCM12802)和嗜热脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus sp. A4)都具有较好的产高温α-半乳糖苷酶的能力，从而为开展嗜热α-半乳糖苷酶的研究提供了良好的实验材料。通过简并引物PCR和基因组序列分析获得了3个27家族的α-半乳糖苷酶基因(N. fischeri的gal27A和gal27B和T. leycettanus的agaA)，以及2个36家族的α-半乳糖苷酶基因(...
【英文摘要】 α-Galactosidase has both hydrolysis ability to catalyze the breakage of α-D-galactoside bond andtransglycosylation activity, and is widely used in the feed, medicine, food and chemical industries. Toalleviate the anti-nutritional effect of galactooligosaccharides in soybean meal and promote animalhealth, α-galactosidase is generally supplemented in the feed stuff. Due to the high cost, low yield, andthermoliability under high-temperature feed processing conditions, application of α-galactosidase ismuch limi...
【更新日期】 2014-10-08

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