定向诱导基因组局部突变技术（Targeting Induced Local Lesions In Genomes，TILLING）是一种新的反向遗传学方法，目前已成功应用于拟南芥、小麦、玉米等多种植物突变体筛选中，鉴定了大量的功能基因。烟草TILLING筛选技术的建立，为烟草功能基因组的研究、控制烟草生理生长的重要基因的克隆、控制烟草重要农艺性状的分子机制研究以及培育烟草新品种具有重要的战略意义。本研究利用0.6%EMS处理的烤烟品种中烟100M2代突变体构建了普通烟草突变群体，并对突变类型和性状分离情况进行了分析。建立并优化了普通烟草LICOR-TILLING分析技术和CE-TILLING的筛选体系，利用上述筛选体系，针对NtLS基因设计特异引物在突变群体中进行了筛选，获得了NtLS基因的突变体，并对M3代NtPAL4突变体进行了基因型鉴定。
本研究的主要内容包括五个方面：
（1）利用0.6%EMS处理的烤烟品种中烟100M2代突变体构建突变体群体，共获得956个株系，10497个突变单株。对突变体性状调查发现M2代出现了多种类型突变性状，主要包括株高变异、叶形变异、株型变异、花期变异等。按...
【英文摘要】
TILLING（Targeting Induced Local Lesions In Genomes）is a newly developed reverse geneticsapproach used to screen mutant population. TILLING has been widely adopted in various crop specieslike Arabidopsis, rice, wheat etc and a pool of functional genes has been successfully identified.Establishment of TILLING screening for tobacco is important tool to study functional genomics intobacco, clone the important genes controlling the various physiological and agronomic traits, study theunderlying mechanism control...
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