Thermotoga neapolitana β-1，3-葡聚糖酶基因的克隆与表达-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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Thermotoga neapolitana β-1，3-葡聚糖酶基因的克隆与表达

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【英文题名】	Cloning and Expression of β-1,3-glucanase Gene from Thermotoga Neapolitana
【作者】	刘琼;
【导师】	陈晓平; 李大军;
【学位授予单位】	吉林农业大学;
【学科专业名称】	食品科学
【学位年度】	2013
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	吉林农业大学
【网络出版投稿时间】	2013-09-23
【关键词】	β-葡聚糖酶; 克隆; 表达; 纯化; 酶学性质;
【英文关键词】	β-1; 3-Glucanase; cloning; expression; purification; enzymatic properties;
【中文摘要】	β-葡聚糖酶是一类能够将葡聚糖降解为葡萄糖的水解酶类,我们已知的β-1,3-葡聚糖酶都是糖基水解酶的第17家族。β-1,3-葡聚糖酶是植物中最重要的抗真菌病害的抗性物质之一,众多体外研究表明,β-1,3-葡聚糖酶能降解真菌的细胞壁并且抑制真菌生长,对植物的抗真菌病害起着重要作用。β-1,3-葡聚糖酶还对谷物中β-葡聚糖的水解具有重要的作用,已经在啤酒、饲料等生产中得到广泛应用。本试验对栖热袍菌DSM4359β-葡聚糖酶进行克隆,将其在大肠杆菌中进行体外表达,并对该酶的部分酶学性质进行研究。首先,参考Gene Bank中栖热袍菌DSM4359β-葡聚糖酶的基因序列,依据表达载体质粒pET-28a(+)的特点设计引物。然后以提取的DSM4359β-葡聚糖酶基因组DNA作为模板,通过上下游引物,利用PCR技术扩增出大小约为0.8kb的产物,之后对该产物进行TA克隆并测序。将目的片段与表达质粒载体pET-28a(+)双酶切,然后用DNA连接酶连接构建重组质粒。将重组质粒转化到感受态细胞大肠杆菌DH5a中,培养后提取质粒,对其进行双酶切,得到两个大小分别为5.4kb及0.8kb的片段,初步判定β-葡聚糖酶克...
【英文摘要】	The β-1,3-glucanase that we have known are all members of the17th family. In the plants, β-1,3-glucanase is one of the most important resistance material which can resist fungal disease. Most studies in vitro showed that β-1,3-glucanase can hydrolyze the cell wall of fungus and inhibit its growth. In addition, β-1,3-glucanase plays an important role in hydrolyzing β-glucan in cereals. Nowadays, β-1,3-glucan-ase is widely used in beer, feed industries. In the study, we want to complete the cloning and expres...
【更新日期】	2013-11-21

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