【英文题名】
A Preliminary Study on Elevated Expression of Foreign Proteins by a Translation Enhancer Sequence of the Gene10Leader
【作者】
李一帆 ;
【导师】
薛乐勋 ;
【学位授予单位】
郑州大学 ;
【学科专业名称】
细胞生物学
【学位年度】
2013
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
郑州大学
【网络出版投稿时间】
2013-07-20
【关键词】
Canstatin ;
翻译增强序列 ;
叶绿体 ;
杜氏盐藻 ;
【英文关键词】
Canstatin ;
translational-enhancing elements ;
chloroplast ;
Dunaliella ;
salina ;
【中文摘要】
叶绿体基因工程是高效表达外源蛋白的有效途径之一。与核转化技术相比,具有许多优点:如基因拷贝数多,表达率高,遗传性状稳定,生物安全性高,能够避免基因沉默和位置效应等。翻译效率是决定表达能力的关键因素,一些翻译增强子能明显提高重组蛋白的表达。来源于T7噬菌体基因10前导序列(g10-L)的一段九个碱基的翻译增强子序列(UUAACUUUA)已被证实在大肠杆菌中能明显提高多种外源基因表达产量达40~340倍,其原理可能是增强mRNA与16S核糖体的识别结合能力进而促进翻译。
实现叶绿体转化需要一个有效的转化载体,这种转化载体中必须具备几个基本元件:同源重组的同源臂、完整的外源基因表达盒(包括启动子、目的基因和调控序列)、筛选标记基因。Lux Ct是以荧光素酶基因Lux AB为基础进行适当改造而成,含有高效的内源性atpA基因启动子及5'UTR和3'UTR,表达盒为atpA5'UTR-gfp基因-rbcL3'UTR。 LuxCt为一种穿梭载体,既可以在原核生物中表达,也可以在真核生物中表达,但是不能进行诱导表达。
肿瘤的生长和转移是血管生成依赖性过程。Canstatin是近年来新发现的一种内源性血管生成...
【英文摘要】
The chloroplast genetic engineering is one of the effective ways to express foreign proteins. Compared with the nucleus transformation, it has several advantages: such as the big gene copy number, the high expression rate, the stable inheritable character, the high biological safety, avoiding of gene silencing and position effect, etc. Additionaly, the translation efficiency is a key point for determining the expression ability. Some translation enhancer sequence can improve the expression of the recombinan...
【更新日期】
2013-11-05
【相同导师文献】
导师:薛乐勋 导师单位:郑州大学 学位授予单位:郑州大学
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