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中性粒细胞弹性蛋白酶NE对人肝癌细胞PI3K/Akt、MEK/ERK信号通路作用的研究  
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【英文题名】 The Impact of Neutrophil Elastase on the PI3K/AKt and MEK/ERK Signaling Pathways of Human Hepatocarcinoma Cell
【作者】 夏天放;
【导师】 易继林;
【学位授予单位】 华中科技大学;
【学科专业名称】 外科学
【学位年度】 2012
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 华中科技大学
【网络出版投稿时间】 2013-05-23
【关键词】 中性粒细胞弹性蛋白酶; PI3K/Akt; 增殖; 凋亡相关信号通路;
【英文关键词】 Neutrophil elastase; PI3K/Akt; Cell proliferation; Apoptosis related; signaling pathways;
【中文摘要】 目的:研究中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)对人肝癌HepG2细胞内PI3K/Akt、MEK/ERK信号通路的作用并探讨相关机制,同时观察NE对HepG2细胞增殖与凋亡的影响,为肝细胞肝癌发病机制的研究提供新的思路。 方法:激光共聚焦法观察NE在细胞内的定位;Western印迹杂交法检测NE作用后HepG2细胞内PI3K/Akt、MEK/ERK信号通路活化状态的变化并分析其相关性;设定不同浓度的NE作用于HepG2细胞,利用CCK-8法检测细胞的增殖情况;用流式细胞仪技术分析特定浓度NE作用后的细胞在受到化疗药物杀伤时细胞凋亡的变化;所得数据采用SPSS17.0软件进行统计分析。 结果:激光共聚焦实验表明NE可以进入细胞内,且主要位于细胞质靠胞膜侧;20nM和40nM的NE处理HepG2细胞后p-Akt的水平分别提高+45%和+74%(P<0.01),40nM组与20nM相比,p-Akt水平提高了20%(P<0.01),Akt、p-MAPK(Erk1/2)和MAPK(Erk1/2)无明显改变(P>0.05); CCK-8法检测不同浓度NE(20nM,40nM)...
【英文摘要】 Objective This research is to investigate the effects of Neutrophil elastase onthe PI3K/Akt and MEK/ERK signaling pathways in human hepatocarcinoma HepG2cells,as well as to explore the mechanism, In addition to observe the impact of NEon the proliferation and the ability to evade apoptosis of HepG2cells,the researchmay provide new ideas for the study of development of hepatocellular carcinoma. Methods Confocal laser was to detect the intracellular localization ofNE;Western blot was used to detect the ac...
【更新日期】 2013-08-13

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导师:易继林    导师单位:华中科技大学    学位授予单位:华中科技大学
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