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双酚A单克隆抗体制备及胶体金免疫层析试纸条的研制  
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【英文题名】 Preparation of Monoclonal Antibody Against Bisphenol A and Establishment of Its Gold-immunochromatography
【作者】 李月明;
【导师】 赵肃清;
【学位授予单位】 广东工业大学;
【学科专业名称】 生物化工
【学位年度】 2012
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 广东工业大学
【网络出版投稿时间】 2012-07-13
【基金】 广东省科技攻关;国家自然资金;
【关键词】 双酚A; 单克隆抗体; 胶体金; 免疫层析试纸条;
【英文关键词】 bisphenol A; monoclonal antibody; colloidal gold; GICA;
【中文摘要】 双酚A(bisphenol A,BPA)是由两分子苯酚和一分子丙酮在酸性条件下催化缩合而成的酚类物质,其结构与天然激素17-B雌激素及人工合成的雌激素相似,为EDCs中的一种,是已确定的外源性雌激素。双酚A是PC的重要原料,许多日常消费品如食品包装容器、婴儿奶瓶等儿童用品都可能含有双酚A,双酚A在加热时能析出,进入到食物和饮料当中。近两年来双酚A引起了人们的高度关注。 本文通过重氮法在双酚A中引入羧基,采用碳二亚胺法将双酚A半抗原与牛血清白蛋白进行偶联,合成双酚A免疫抗原,再采用混合酸酐法和卵清蛋白偶联得到包被抗原。用免疫抗原对BALB/c鼠进行免疫,经测定血清效价及特异性筛选有效免疫的小鼠。利用PEG法对小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,筛选效价高,亲合力好细胞株,经3次有限稀释亚克隆后建立稳定的细胞株。通过体内诱生腹水制备大量单克隆抗体,收集腹水并采用辛酸-硫酸铵沉淀法进行纯化,SDS-PAGE和紫外分光光度法鉴定抗体纯度和含量。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记双酚A单克隆抗体,依据免疫层析技术研制检测双酚A残留的免疫层析快速检测试纸条。 实验结果：(1)经紫外扫描及SDS-PA...
【英文摘要】 Bisphenol A (bisphenol A, BPA) is one kind of phenolic substances which were synthetized by two molecular phenol and one molecular acetone in acid conditions. Its structure is similar with the natural hormones17-β estrogen and synthetic hormenes, which has been identified as one kind of exogenous estrogen, for one of the EDCs. Bisphenol A is an important raw material for the PC. BPA is contained in many daily consumer goods such as food packaging containers and articles for children including baby bottles. ...
【更新日期】 2012-12-14

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导师：赵肃清    导师单位：广东工业大学    学位授予单位：广东工业大学
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