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Bispora antennata来源的三个糖苷水解酶基因的克隆与表达  
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【英文题名】 Gene Cloning and Expression of Three Glycosyl Hydrolases from Bispora Antennata
【作者】 刘琼;
【导师】 姚斌;
【学位授予单位】 中国农业科学院;
【学科专业名称】 生物化学与分子生物学
【学位年度】 2012
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 中国农业科学院
【网络出版投稿时间】 2012-07-25
【关键词】 Bispora; antennata; 木聚糖酶; β-甘露聚糖酶; β-葡聚糖酶; 基因克隆与表达;
【英文关键词】 Bispora antennata; β-xylanase; β-mannanase; β-glucanase; gene cloning and expression;
【中文摘要】 Bispora属的真菌能分泌多种重要的糖苷水解酶,这些酶对半纤维素和纤维素的降解起到了重要的作用。本论文以Bispora antennata为菌源,获得了一个第十一家族木聚糖酶、一个第五家族β-甘露聚糖酶和一个第五家族β-葡聚糖酶的基因,这些基因均在毕赤酵母中表达后并进行了纯化和酶学性质的研究。 通过简并PCR和TAIL-PCR技术,从B. antennata中克隆得到了一个木聚糖酶基因xyn11,一个β-甘露聚糖酶基因man5和一个β-葡聚糖酶基因cel5,同源比对和序列一致性分析结果表明xyn11编码的成熟蛋白Xyn11氨基酸序列与来源于Alternaria sp. HB186的第十一家族的木聚糖酶的一致性最高,为74%,与一些十一家族的中高温木聚糖酶序列比较Xyn11在N端多余出9个氨基酸;man5的编码蛋白Man5与来源于Aspergillus aculeatus的一个第五家族的甘露聚糖酶一致性最高,为58%;cel5的编码蛋白Cel5与来源于Botryotinia fuckeliana的一个第五家族的葡聚糖酶一致性最高,为64%。以上结果表明这些基因均具有一定的新颖性。 重组Xyn1...
【英文摘要】 Fungi of genera Bispora can secrete a variety of important glycoside hydrolases, includingxylanase, β-mannanase, β-glucanase etc, that are important enzymes for degradation of hemicelluloseand cellulose. In this study, Bispora antennata was selected as the microbial source for identification ofmore novel glycoside hydrolase genes. All the genes were expressed in Pichia pastoris, and therecombinant enzymes were purified and characterized. Through degenerate PCR and TAIL-PCR techniques, a xylanase gene xy...
【更新日期】 2012-09-24

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