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利用新型转基因载体消除植物转基因中的同源共抑制现象  
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【英文题名】 Eliminate Homologous Co-suppression in Plant Transgenesis by Novel Transgenic Vectors
【作者】 孔莹莹;
【导师】 王君晖;
【学位授予单位】 浙江大学;
【学科专业名称】 遗传学
【学位年度】 2012
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 浙江大学
【网络出版投稿时间】 2012-06-28
【关键词】 同源共抑制; 转录水平基因沉默; 转录后水平基因沉默; RNA干涉抑制;
【英文关键词】 homologous co-suppression; transcriptional gene silencing; post-transcriptional gene silencing; suppress of RNA silencing;
【中文摘要】 外源基因在不同的转基因植物株系间会呈现很大的表达差异,甚至出现同源共抑制现象,即转基因在其自身不表达的同时也造成与它同源的内源基因的沉默。转基因沉默和同源共抑制主要包括转录水平沉默(TGS)和转录后水平沉默(PTGS)。高度转录的外源基因所产生的紊乱RNA触发了RNA干涉机制,是造成转基因沉默和同源共抑制的主要原因。 通常情况下,转入植物体内的外源基因是没有非翻译区(UTR),内含子以及其它的基因间非编码序列的,这可能是转基因沉默和同源共抑制的原因之一。为了证实这个观点,我们构建了一些含有5'UTR、内含子、3'UTR和基因间非编码序列的载体,并以拟南芥Cobra基因作为研究对象来进行相关的研究。对照情况下,Cobra发生100%同源共抑制,使用了改进的转基因载体后,我们发现如下结果:在外源Cobra编码区前加入一个自身内含子能使同源共抑制的发生减少30%,而加入自身5'UTR并不能阻止基因沉默现象的出现。在外源Cobra的3'UTR处加入果蝇bcd基因3'UTR,并表达它的结合蛋白Stau,能使同源共抑制现象的发生减少68%;加入6/12/24ms2,并表达其结合蛋白MS2,也能在一定程度上抑制同源...
【英文摘要】 Pronounced variability of transgene expression and transgene silencing are commonly observed among independent plant lines transformed with the same construct. Transgenes can also cause the silencing of endogenous plant genes if they are sufficiently homologous, a phenomenon known as homologous co-suppression. Homologous co-suppression occurs transcriptionally and post-transcriptionally but predominantly post-transcriptionally. A major reason for transgene silencing and homologous co-suppression is that abe...
【更新日期】 2012-09-12

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导师:王君晖    导师单位:浙江大学    学位授予单位:浙江大学
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