【英文题名】
Functional Analysis of the Melanin Biosynthesis Genes St4HNR and St3HNR in Setosphaeria Turcica
【作者】
郭欣欣 ;
【导师】
董金皋 ;
【学位授予单位】
河北农业大学 ;
【学科专业名称】
植物学
【学位年度】
2012
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
河北农业大学
【网络出版投稿时间】
2012-06-26
【关键词】
玉米大斑病菌 ;
还原酶基因 ;
基因敲除 ;
功能分析 ;
【英文关键词】
Setosphaeria turcica ;
reductases ;
Gene knock-out ;
Functional analysis ;
【中文摘要】
实验室前期研究结果表明,玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)能够合成DHN黑色素且与致病力密切相关,并克隆了黑色素合成途径中的2个HN还原酶基因(St3HNR和St4HNR)。为进一步明确HN还原酶基因在玉米大斑病菌黑色素合成中的作用以及2个HN还原酶基因相互间的关系,本研究利用基因敲除技术创制了St4HNR基因缺失突变体和St3HNRSt4HNR双基因缺失突变体,通过对突变体进行分析,明确基因功能。
以质粒pBS为敲除载体,抗生素G418为抗性筛选指标,构建St4HNR基因敲除载体。利用聚乙二醇(PEG)介导法将构建好的基因敲除载体转化玉米大斑病菌野生型菌株01-23和St3HNR基因缺失突变体菌株的原生质体中,经G418筛选,PCR特异引物验证得到St4HNR单基因缺失突变体和St3HNRSt4HNR双基因缺失突变体。
对突变菌株进行表型分析,结果发现,△St4HNR突变体菌落正面呈白色,背面黑褐色,较野生型菌株颜色浅;△St3HNR△St4HNR双基因缺失突变体菌落正面呈白色,背面呈浅红棕色,较△St4HNR突变菌株菌落颜色还要浅。本实验前期获得△St3HNR菌株,颜...
【英文摘要】
Preliminary results in our laboratory showed that DHN melanin was accumulated in Setosphaeria turcica which was related to pathogenicity. Two naphthol reductases genes, St3HNR and St4HNR, in DHN melanin biosynthesis of S. turcica were cloned. In order to confirm the function and the relationship of the two genes in DHN melanin biosynthesis, Knock-out technique was used to construct St4HNR gene deleted mutants, St3HNR and St4HNR double genes deleted mutants. The function of the genes was identified by analyz...
【更新日期】
2012-07-10
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