【英文题名】
Separation of C57BL/6J Mice Liver Cells and Establishment of Mice Hepatocytes Protein Expression Profiling
【作者】
潘君风 ;
【导师】
郭蔼光 ;
【学位授予单位】
西北农林科技大学 ;
【学科专业名称】
生物化学与分子生物学
【学位年度】
2011
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
西北农林科技大学
【网络出版投稿时间】
2011-12-27
【基金】
国家自然科学;
【关键词】
肝脏细胞 ;
原位灌流 ;
分选细胞 ;
微量全二维液相系统 ;
蛋白质表达谱 ;
【英文关键词】
liver cell ;
in suti perfusion ;
cell sorting ;
nano-2D-LC ;
protein expression profiling ;
【中文摘要】
肝脏是哺乳动物体内最重要和最复杂的器官之一,承担着体内的物质代谢,血浆蛋白的合成,储存维生素和糖原,解毒和胚胎发育阶段的造血功能,和免疫防御应答等功能。人类肝脏蛋白质组计划实施以来,在组织水平和亚细胞水平对人和小鼠的肝脏已经进行了大量蛋白质组学方面的研究,取得了很多具有重要意义的研究成果,积累了大量的高可信度的肝脏蛋白质表达谱数据。随着研究的进一步深入,许多诸如肝脏不同细胞类群的蛋白质组成和修饰方式,肝脏组织和亚细胞来源的蛋白质分子的细胞定位,肝脏不同类型细胞基本生命活动的动态蛋白质组变化,以及肝脏疾病的发生机制等基本的科学问题都亟待细胞水平的肝脏蛋白质组学研究来解决。开展肝脏不同细胞类群的蛋白质组学研究,已经成为肝脏蛋白质组学研究的新趋势和重要内容。构建肝脏不同细胞类群蛋白质表达谱的研究工作是解决以上这些科学问题的基础。
获得足够纯度和数量的肝脏原代细胞是构建肝脏不同细胞类群蛋白质表达谱研究的基础。本研究通过改良Seglen大鼠肝细胞分离法,建立了小鼠肝脏细胞分离的原位循环两步灌流法。采用该方法对C57小鼠肝脏进行原位循环灌流,离体消化肝脏组织,差速离心获得纯化的小鼠肝细胞,显微形态观察、伊红苏木精...
【英文摘要】
Mammalian liver is one of the most important and complexest organs of the body, it undertakes the metabolism, synthesis of plasma proteins, storage of glycogen and vitamins, detoxification and hematopoietic function during embryonic development, and also takes part in immune defense response and other functions. Since Human Liver Proteome Project implemented. It has been taken a large number of proteomic researches on the human and mouse liver tissue and subcellular level, got many significant research resu...
【更新日期】
2012-02-09
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