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大麦坚黑粉菌遗传转化体系优化及其侵染机制初探  
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【英文题名】 Optimization of Genetic Transformation System and Preliminary Investigation on the Infection Mechanism of Ustilago Hordei
【作者】 张新明;
【导师】 朱睦元;
【学位授予单位】 浙江大学;
【学科专业名称】 遗传学
【学位年度】 2010
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 浙江大学
【网络出版投稿时间】 2011-05-23
【关键词】 大麦坚黑粉菌; 遗传转化; ATMT方法; 单倍体孢子配对; 侵染; 大麦;
【英文关键词】 Ustilago hordei; genetic transformation; ATMT method; sporidial mating; infection; barley;
【中文摘要】 大麦坚黑粉菌(Ustilago hordei)是一类引起大麦产生黑粉状病穗的真菌,严重危害全球的大麦生产。本论文研究了大麦坚黑粉菌的生理特性及其侵染机制,建立了大麦坚黑粉菌的遗传转化体系,并对转化相关因子作了优化,获得了如下主要结果： 1.用两个真菌基因表达启动子gpdA和hsp70分别替换质粒pCAMBIA1301中的35S启动子,构建了真菌表达载体3×pgpdA-1301和3×phsp70-1301。然后进一步引入GFP报告基因,获得了载体3×pgpdA-1301-GFP和3×phsp70-1301-GFP。这四个载体均可用于大麦坚黑粉菌的遗传转化,其转化子可通过载体上的潮霉素抗性基因或GFP进行筛选。 2.通过对影响大麦坚黑粉菌生长状态条件因子如培养温度、培养基pH和培养基组成等的分析和优化,确定了适合于大麦坚黑粉菌生长的较佳条件：温度23℃,pH7.0。培养基组成对黑粉菌生长影响较小,低浓度碳源、氮源即可满足生长,且盐离子对生长影响较小。 3.比较了PEG-CaCl2法、电击法和农杆菌介导(ATMT)法对大麦坚黑粉菌的转化效率,明确ATMT法显著优于其他两种方法。然后在ATMT...
【英文摘要】 Ustilago hordei is a kind of basidiomycete fungi that causes covered smut of barley(Hordeum vulgare L.), which can bring about significant yield loss to global barley production. In this paper, we studied the physiological and infection properties of Ustilago hordei. To establish a gene transformation system of Ustilago hordei, ATMT(Agrobacterium tumefaciens mediated transformation) method was chosen, and the factors might influence transformation efficency were optimized. In addition, how Ustilago hordei m...
【更新日期】 2011-07-26

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