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薰衣草芳樟醇合成酶的基因克隆、功能鉴定及转基因技术的研究  
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【英文题名】 Studies on Gene Clone and Functional Identify as Well as Gene-transfer of Linalool Synthase of Lavandula Officinalis
【作者】 张雪荣;
【导师】 慈忠玲;
【学位授予单位】 内蒙古农业大学;
【学科专业名称】 林木遗传育种
【学位年度】 2007
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 内蒙古农业大学
【网络出版投稿时间】 2008-02-20
【关键词】 薰衣草; 单萜; 芳樟醇合成酶; Southern; Blotting; Northern;
【英文关键词】 Lavandula officinalis; Monoterpene; Linalool synthase; Southern Blotting; Northern Blotting;
【中文摘要】 通过RT-PCR方法用兼并引物从薰衣草中克隆了一个600bp的序列。在Genebank里进行序列比对后与芳樟醇合成酶具有最大的相似性,为76%。通过3’RACE和5’RACE技术克隆到了基因的全长cDNA序列,为1809bp,其蛋白序列为603个氨基酸。蛋白序列与单萜类合酶基因的蛋白序列进行比对,此序列具有单萜类合酶的所有保守氨基酸功能序列DDXXD以及5端的RR功能基团。核酸及蛋白序列功能分析表明所克隆的基因属于芳樟醇合酶基因家族,命名为Llis。设计全长引物,得到了Llis的全长cDNA。用全长引物从薰衣草中克隆到了基因组全长序列,为2320bp。对其进行分析表明,基因组序列含有6个内含子,7个外显子。Southern Blotting结果表明在薰衣草中Llis可能存在2个拷贝数。构建了Llis的原核表达载体、植物转基因表达正义及反义载体。原核表达结果表明表达出来的蛋白与所预期的蛋白大小是一致的,约为60KD。用植物表达载体经烟草叶盘转化法侵染了野生型烟草。通过ppt的筛选以及提取烟草基因组,用PCR的方法得到了转基因烟草的阳性植株。Northern Blotting结果分析表明转基因...
【英文摘要】 A 600bp sequence was cloned from lavandula officinalis through RT-PCR by using degenerate primers. After comparing with the sequences in Genebank, the sequence was found to share the highest similarity (76%) with the sequence of linalool synthase. The whole cDNA sequence was cloned through 3’RACE and 5’RACE, and the size is 1809bp. The protein sequence contains 603 residues. comparing the protein sequence with the members of monoterpene synthase family, and the result suggested that the sequence ...
【更新日期】 2008-03-06

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