重组巴斯德毕赤酵母发酵生产几丁质酶的研究-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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重组巴斯德毕赤酵母发酵生产几丁质酶的研究

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【英文题名】	Fermentation Production of Alk Rice Chitinase by Recombinant Pichia Pastoris
【作者】	吴仲;
【导师】	刘兴华; 阎瑞香;
【学位授予单位】	西北农林科技大学;
【学科专业名称】	食品科学
【学位年度】	2007
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	西北农林科技大学
【网络出版投稿时间】	2007-11-15
【关键词】	巴斯德毕赤酵母; 发酵; 几丁质酶; 酶活; 蛋白表达量;
【英文关键词】	Pichia pastoris; fermentation; chitinase; enzyme activity; heterolgous protein expression level;
【中文摘要】	几丁质广泛分布于动物、微生物体内,是自然界中含量仅次于纤维素的生物多聚物,年生物合成量达100亿吨。作为自然界中唯一大量合成的碱性多糖,其具有很多不同于其他多糖的特性,并显现出独特的应用价值,是糖生物学开发应用研究的一个热点。几丁质酶(EC3.2.1.14)能将几丁质β-1,4糖苷键水解,最终分解为N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)。在作物抗真菌病害、人类治疗真菌病、几丁质深加工等领域前景看好。因此,几丁质酶的批量生产势在必行。本研究的内容即是采用一株Mut+表型的重组巴斯德毕赤酵母生产水稻碱性几丁质酶,对发酵过程进行优化,并对其理化性质进行分析。试验在摇瓶水平对巴斯德毕赤酵母表达几丁质酶的诱导条件进行了研究,得到的结果为:培养基以有机培养基BMMY为宜;离心与否对外源蛋白表达影响不大;添加0.5%的(NH4)2SO4、0.05%的油酸、添加1.0%的甲醇混合0.1%的甘油、0.67%的YNB、1.5%的酵母抽提物、pH6.0、每12 h补加一次甲醇、诱导108 h,重组几丁质酶表达量最高,提高甲醇浓度稳定性有利于蛋白表达量的提高;而添加氧载体抑制外...
【英文摘要】	Chitin is aβ-1,4-linked,insoluble linear polymer of N-acetylglucosamine (GlcNAc)and is the second most abundant organic compound on our planet following cellulose, biosynthesize 10 billion per year. And it’s distributed in animal, microbe. As the exclusive alk polysaccharide of the nature, there are some special characteristics of chitin. It is became the focal point of the exploratory development for its particular function. Chitinase(EC3.2.1.14) is a glycosyl hydrolase that catalyzes t...
【更新日期】	2007-11-28

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