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PRGL基因的原核表达及抗体制备  
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【英文题名】 Prokaryotic Expression of PRGL and Preparation of Its Antibody
【作者】 周剑波;
【导师】 王小菁; 李德红;
【学位授予单位】 华南师范大学;
【学科专业名称】 细胞生物学
【学位年度】 2007
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 华南师范大学
【网络出版投稿时间】 2007-11-05
【基金】 广东省自然科学基金;国家自然科学基金
【关键词】 PRGL基因; PRP片段; 原核表达; 多克隆抗体;
【英文关键词】 PRGL; PRP; Prokaryotic Expression; Polyclonal Antibody;
【中文摘要】 PRGL(Proline-Rich GASA-like)是本实验室从非洲菊花瓣克隆的新基因。该基因既具有GASA的同源部分,也有与PRP基因结构相似的区域,初步认为该基因可能与GA诱导有关,并可能定位于细胞壁。为了研究PRGL的功能,本研究将编码PRGL全长的基因以及编码PRP区域的序列分别进行原核表达并制备多克隆抗体,为进一步研究奠定基础。主要研究结果如下: 本实验用pET32a构建pET32a-PRGL原核表达载体,经DNA测序正确后,在菌液起始浓度OD_(600)为0.6,IPTG浓度为0.6mM,28℃诱导时间为6h条件下,诱导表达出34.76kD的PRGL目的蛋白。用pET30c构建pET30c-PRP原核表达载体,经DNA测序正确后,在菌液起始浓度OD_(600)为0.6,IPTG浓度为1.0mM,28℃诱导时间为6h条件下,获得13.64kD的含有PRP区域的目的蛋白。随后利用融合蛋白中自带的His标签,证明了融合蛋白表达的正确性。 通过对诱导表达后的蛋白进行定量,注射新西兰兔进行免疫。在对家兔进行免疫之前,先耳缘静脉取血,获得血清,-80...
【英文摘要】 PRGL is a new gene isolated from Gerbera petals in our lab. It contains ahomological domain of GASA and a similar structure of PRP. It is presumed thatPRGL might be involved in GA induced growth and localized in the cell wall. In thepresent study, polyclonal antibodies were prepared by constructing of recombinantprokaryotic expression plasmid in order to study the functions of PRGL. The mainresults are as follows: The plasmid pET32a was used to construct the recombinant prokaryoticexpres...
【更新日期】 2007-12-11

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