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甘蓝型油菜“蜀杂九号”防御素基因全长cDNA的克隆与原核表达  
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【英文题名】 The Cloning, Analysis of the Full-length cDNA of Plant Defensins from Shuza No,9 of Brassica Napus and Its Expression in Escherichia Coil
【作者】 王轶;
【导师】 李旭锋; 杨毅;
【学位授予单位】 四川大学;
【学科专业名称】 遗传学
【学位年度】 2005
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 四川大学
【网络出版投稿时间】 2005-10-08
【关键词】 甘蓝型油菜; 防御素; 原核表达;
【英文关键词】 Brassica napus; defensins; prokaryotic expression;
【中文摘要】 植物防御素是一类广泛分布于植物种子的阳离子、低分子量的短肽。其能强烈抑制病原微生物的入侵,是植物先天性非特异免疫的重要组成部分。尤其是被认为能通过真菌细胞膜上特异受体而强烈抑制丝状真菌的生长。研究表明,其保守的含有8个Cys,而形成4个二硫键。因其与动物防御素同源而得名。 本实验根据GenBank数据库中登记的十字花科植物防御素基因序列,运用Primer5.0软件设计了两个引物5’-GCGGAATTCATGGCTAAGTTTGCTTCC-‘3和5’-CGCTCTAGATTAACATGGGAAATAACAGATAC-‘3,并为后插入到改造自Pharmacia公司的pGEX—2T克隆表达载体GTK中而加入了EcoRⅠ和XbaⅠ的酶切位点(粗体部分)。从正在萌发的甘蓝型油菜“蜀杂九号”的种子提取总RNA,反转录为cDNA。并以此为模板进行PCR扩增,成功地从甘蓝型油菜中克隆出长243bp编码80个氨基酸的防御素基因的cDNA序列。 将所得甘蓝型油菜防御素基因的cDNA片段插入到pGEX—2T表达载体GTK的EcoRⅠ和XbaⅠ多克隆位点之间。将重组原核表达质粒...
【英文摘要】 Plant defensins, a kind of low MW cationic peptides widely distributed in many plant seeds, have strong ability to inhibit pathogen. As multifunctional effetor molecules of non-specificity innate immunity, defensins are the key components in plant immunity system. Plant defensins are thought to interact with specific receptor harboring in the cell membrane and inhibit the growth of fungi, especially filamentous fungi. Plant defensins have conserva(?)e eight Cys residues and form four intramolecular cysteine...
【更新日期】 2006-02-16

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