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农杆菌介导EPSPs基因导入油菜的研究  
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【英文题名】 Genetic Transformation of EPSPs to Rape (Brassica napus L.) Mediated by Agrobacterium Tumefaciens
【作者】 祁星华;
【导师】 李旭锋; 杨毅;
【学位授予单位】 四川大学;
【学科专业名称】 遗传学
【学位年度】 2005
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 四川大学
【网络出版投稿时间】 2005-10-08
【关键词】 甘蓝型油菜; EPSPs; 农杆菌介导法; 草甘膦;
【英文关键词】 Brassica napus L.; EPSPs; Agrobacterium tumefaciens; Glyphosate;
【中文摘要】 以优质高产杂交油菜新品种“蜀杂九号”恢复系材料84100-18(Brassica napus L.)油菜品系为受体材料,分析讨论了预培养,苗龄,激素浓度等影响油菜遗传转化体系的因素。并通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒介导途径,将抗除草剂基因EPSPs转入甘蓝型油菜,经过诱导和分化获得转基因草甘膦抗性植株,并进行PCR检测以及Southern-blot检测,并对T_0和T_1代抗性植株进行抗性检测和育性试验。 主要实验结果如下: 1.通过对比观察外植体的诱导及分化情况,建立并优化了油菜植株的再生体系。试验表明:下胚轴的分化频率高于子叶;8天的苗龄的外植体出愈率很高;预培养会增加下胚轴的分化频率;MS+3mg/L6-BA时芽的分化率最高;AgNO_3可提高下胚轴芽的分化率;提高琼脂浓度,降低蔗糖含量可以减少玻璃化现象。 2.用含有EPSPs基因的植物表达载体p35S-2300-EPSPs的根癌农杆菌转化油菜,对各项转化条件进行优化,确定农杆菌EHA105转化油菜外植体的最佳条件确定用植株再生...
【英文摘要】 In my thesis, restorer line of SHUZHA No.9which is a new sort of hybrid rape(brassica napus) is used as my experimental material .The factors which influence the effect of the transformation are discussed, including the factors like pre-culture, seed age, concentration of hormone, etc. The plants are transformed by Agrobacterium tumefaciens-mediation method, and during the induction and differentiation, some of them are proved by PCR and Southern-blotting. Some transgenic plants and their offspring show hig...
【更新日期】 2006-02-16

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