南方红豆杉（Taxus chinensis var.mairei）苯丙氨酸CoA酰基转移酶（BAPT）基因cDNA的克隆及原核表达 在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】
Cloning and Prokaryotic Expression of the Phenylpropanoid CoA Acyltransferase (BAPT) cDNA of Taxus Chinensis Var.Mairei
【作者】
曹红 ;
【导师】
王刚 ;
【学位授予单位】
河北师范大学 ;
【学科专业名称】
植物学
【学位年度】
2005
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
河北师范大学
【网络出版投稿时间】
2005-08-08
【关键词】
红豆杉 ;
紫杉醇 ;
苯丙氨酸CoA酰基转移酶(BAPT) ;
原核表达 ;
抗体 ;
复性 ;
【英文关键词】
taxus ;
taxol ;
phenylpropanoid CoA acyltransferase(BAPT) ;
prokaryotic expression ;
antibody ;
renaturation ;
【中文摘要】
紫杉醇是一种四环二萜酰胺类化合物,1992底被美国FDA批准作为抗癌药物上市。它的作用机理在于能促进微管聚合抑制降解,从而抑制细胞有丝分裂。它广泛存在于红豆杉属植物中,但是红豆杉生长缓慢且紫杉醇含量低,因此运用生物化学和基因工程手段对紫杉醇生物合成途径、合成过程中关键酶及其编码基因的研究成为增加红豆杉中紫杉醇产量的一种新途径。
本研究根据已发表的东北红豆杉苯丙氨酸CoA酰基转移酶(BAPT)的cDNA序列设计引物,用RT-PCR方法克隆到编码南方红豆杉苯丙氨酸CoA酰基转移酶的cDNA全长,经序列分析该cDNA全长为1338bp,与已报道的该酶基因cDNA相比,其核苷酸同源率为97.76%。
我们将此cDNA按正确的读码框架克隆至原核表达载体pET28b(+)中,即pET-BAPT,转化E.coliBL21(DE_3),重组BAPT实现高效表达,主要以包涵体的形式存在,改变和优化诱导条件未能使目的蛋白得到可溶性表达。采用SDS-PAGE凝胶回收法对重组蛋白进行纯化,以此为抗原免疫大白兔,制备了该蛋白的多克隆抗血清,抗体效价为1:10~5,为通过Weste...
【英文摘要】
Taxol,a deterpene amide,has been approved for the treatment of cancers by US Food and Drug Administration(FDA) in 1992.It can promote microtubule's aggregation and restrain cell's mitosis. Taxol is widely distributed in the yew trees(Taxus spp.),but yew trees grow slowly and contain only small amount of taxol.It is new way to study taxol biosynthetic pathway、 the key enzymes catalyzing this sequence of reactions and the genes encoding these proteins by new means of biochemistry and gene engineering to impro...
【更新日期】
2005-10-14
【相同导师文献】
导师：王刚 导师单位：河北师范大学 学位授予单位：河北师范大学G蛋白和H_2O_2在保卫细胞信号转导中的关系 [D]. 河北师范大学,2005南方红豆杉（Taxus chinensis var.mairei）苯丙氨酸CoA酰基转移酶（BAPT）基因cDNA的克隆及原核表达 [D]. 河北师范大学,2005小麦谷氨酰胺合成酶前体Ⅱ基因的功能研究 [D]. 河北师范大学,2007安祖花类原球茎体的诱导及其成苗的研究 [D]. 河北师范大学,2002红豆杉细胞培养中紫杉醇代谢调节的研究 [D]. 河北师范大学,2003小麦（Triticum aestivum L.）苗期水分胁迫诱导表达差异cDNA的研究 [D]. 河北师范大学,2003玉米小斑病菌C小种致病特性及HMC毒素对细胞骨架微丝分布影响的研究 [D]. 河北师范大学,2003高羊茅抗渗透胁迫基因工程改良的研究 [D]. 河北师范大学,2004茉莉酸甲脂诱导的南方红豆杉（Taxus chinensis var. mairei）差异表达cDNA的研究 [D]. 河北师范大学,2004干旱胁迫下玉米ABA和pH与钙信使的关系研究 [D]. 河北师范大学,2004
【相似文献】
中国期刊全文数据库
中国优秀硕士学位论文全文数据库
中国博士学位论文全文数据库
中国重要会议论文全文数据库
中国重要报纸全文数据库
中国学术期刊网络出版总库
【文献分类导航】从导航的最底层可以看到与本文研究领域相同的文献，从上层导航可以浏览更多相关领域的文献。
| 
点击下列相关研究机构和相关文献作者，可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献，使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。
