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低温诱导表达载体的构建与冷激蛋白cspA基因启动子区调控表达的机制研究  
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【英文题名】 Construction of Low Temperature-induced Expression Vector and the Study on the Regulation Mechanism of the cspA Promoter Region
【作者】 马波;
【导师】 孙晖;
【学位授予单位】 东北师范大学;
【学科专业名称】 遗传学
【学位年度】 2005
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 东北师范大学
【网络出版投稿时间】 2005-07-07
【关键词】 冷激蛋白; CspA; 启动子; 低温诱导; 抗菌肽; 表达载体;
【英文关键词】 cold shock proteins; CspA promoter; low temperature- induce; cecropin; expression vector;
【中文摘要】 当温度突然降低时,原核生物和真核生物都会表现出冷激反应,它们会通过合成冷激蛋白(cold shock proteins,CSPs)来克服冷激的不利影响。CspA 是大肠杆菌中一种主要的冷激蛋白,近来研究人员对其结构、功能和在转录、翻译水平的调控以及 mRNA稳定性等方面作了大量研究。但对于 CspA 基因上游调控元件存在的真实性、5’-UTR 3’端的作用,以及两个 ATGAAA 序列基元的作用机制仍然存在很大的争议。 本实验旨在构建包含 CspA 冷激启动子的低温表达载体,探讨 cspA 启动子及其上下游区域的表达调控机制,并通过报告基因 cecropinB 测定其转录表达活性,同时期望获得 CecropinB 的高效融合表达载体。本论文所使用的 CecropinB 是黑腹果蝇的一种抗菌肽的前体,含有 63 个氨基酸序列,其中 1-23 aa 为信号肽序列。抗菌肽能抵抗果蝇正常生活环境中的各种病原微生物的感染,是自然免疫系统的一部分,可以导致大肠杆菌的死亡。 以 E. coli 基因组 DNA 为模板扩增了 9 段具有 CspA 冷激启动子及其他不同调节元件的片段...
【英文摘要】 Both prokaryotes and eukaryotes exhibit a cold-shock response upon an abrupttemperature downshift. About 26-27 cold-shock proteins are synthesized to overcome thedeleterious effects of low temperature stress. CspA, the major cold-shock protein ofEscherichia coli, has recently been studied with respect to its structure, function andregulation at the level of transcription, translation and mRNA stability, especially the functionof 5’-UTR of its mRNA. Overexpression of proteins in E. coli at low tem...

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