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农杆菌介导的盐生杜氏藻Dscbr基因转化紫花苜蓿的初步研究  
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【英文题名】 Transformation of Alfalfa (Medicago Sativa L.) by Agrobacterium-mediated Process with Dscbr Gene from Dunaliella Salina
【作者】 陈晨;
【导师】 曹致中; 曹毅; 乔代蓉;
【学位授予单位】 甘肃农业大学;
【学科专业名称】 草业科学
【学位年度】 2004
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 甘肃农业大学
【网络出版投稿时间】 2005-01-26
【关键词】 紫花苜蓿; 组织培养; 遗传转化; Dscbr基因; 抗逆性;
【英文关键词】 alfalfa (Medicago sativa L.); tissue cultivation; genetic transformation; Dscbr gene; stress-tolerance;
【中文摘要】 逆境胁迫严重影响到植物的生长,提高植物抗逆性的研究因而有着极为重要的现实意义。紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是当今世界上种植面积最大,应用最广泛的多年生豆科牧草。借助植物基因工程手段提高苜蓿抗逆性是现代育种的重要途径。本文利用农杆菌介导法,将从盐生杜氏藻(Dunaliella salina)中克隆到的抗逆基因Dscbr(编码一种早期光诱导蛋白)转入紫花苜蓿中,提高其抗逆性。 首先以再生能力强的“中苜一号”苜蓿品种作为受体材料,以叶片作为外植体接种于UM+2,4-D(2.0mg/L)+ KT(0.25mg/L)培养基上,经愈伤组织诱导、胚状体分化、生芽和生根培养,形成了完整的再生植株,建立了适合于遗传转化操作的苜蓿再生系统。为了提高转化效率,利用植物表达载体pCAMBIA2301G中的GUS基因进行转化条件的优化,经GUS组织化学染色、抗性愈伤组织分析其转化条件为:叶片预培养4-5d,用农杆菌菌液(OD600=0.3~0.8)侵染20min,然后在培养基上铺一层灭菌滤纸共培养7d后清洗。在此基础上将Dscbr基因构建到植物表达载体pCAMBIA2301G中,采用冻融法转化到...
【英文摘要】 Abstract: Adverse environmental stresses have bad effects on growth of plant, so it is very important to study improving alfalfa for tolerance to abiotic stesses. Cultivated alfalfa(Medicago sativa L.), perennial legume crop, is wildly planted in the world and is one of the most frequently studied species. The development of plant gene engineering creates an important approach for alfalfa stress-resistant breeding. In this research, to increase superoxide-scavenging capacity and thereby to improve stresses ...

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