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根癌农杆菌介导的MAPKK基因转化大岩桐的研究  
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【英文题名】 Studies on the Agrobacterium-mediated Transformation of Siningia Specosia with MAPKK
【作者】 代建丽;
【导师】 王小菁; 李洪清;
【学位授予单位】 华南师范大学;
【学科专业名称】 植物学
【学位年度】 2004
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 华南师范大学
【网络出版投稿时间】 2004-07-06
【基金】 广东省自然科学基金
【关键词】 MAPKK基因; 大岩桐; 根癌农杆菌; 遗传转化;
【英文关键词】 MAPKK; Sinningia speciosa; Agrobacterium tumefaciens; Genetic transformation;
【中文摘要】 促分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)是生物体内信号转导途径的关键组分之一,已发现它组成的信号转导级联途径在植物中起着多方面的作用。用基因工程技术定向改良花卉品质,是当今花卉育种的重要内容。本研究用野生型、突变型MAPKK基因转化观赏花卉大岩桐,为进一步研究MAPKK基因的功能奠定基础,也为花卉植物的转基因提供实验系统。 本研究构建了野生型、突变型MAPKK基因植物表达载体,并用冻溶法将其导入了根癌农杆菌LBA4404。载体构建的过程包括目的基因的PCR扩增、目的基因连接到pMD 18-T载体、目的基因连接到中间表达载体pIB1、目的基因及启动子、终止子连接到表达载体pBin19。最后得到的植物表达载体pBM含目的基因及植物选择标记基因NPTⅡ。 以叶盘为外植体,初步建立了大岩桐的遗传转化体系。研究发现,卡那霉素(Kan)对大岩桐不定芽和不定根的诱导有较强的抑制作用,其选择浓度分别为50 mg/L和10 mg/L。头孢霉素(Ce)对大岩桐不定芽的诱导也有抑制作用,但较卡那霉素弱,其抑制农杆菌生长的适宜浓度为200 mg/L。在...
【英文摘要】 MAPKKs (mitogen-activated protein kinase kinases) are the key components in the signal transduction passways which regulate a variety of cellular processes in eukaryotes including in plants. In the present study, an omanental flower Sinningia speciosa was transformed with tMEK2 and tMEK2MUT:, the wild type and mutant type of MAPKK from tomato, by Agrobacterium tumefaciens. The aim of this research is to establish a transgenic system for flower plants and investigate the functions of MAPKK in tra...

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