百合花粉酪蛋白激酶2α亚基cDNA克隆及其序列分析-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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百合花粉酪蛋白激酶2α亚基cDNA克隆及其序列分析

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【英文题名】	Cloning and Characterization of the cDNA Encoding Casein Kinase2 Alpha Subunit from Lily Pollen
【作者】	张忠琴;
【导师】	孙颖; 孙大业;
【学位授予单位】	河北师范大学;
【学科专业名称】	细胞生物学
【学位年度】	2002
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	河北师范大学
【网络出版投稿时间】	2002-09-09
【关键词】	类整合素; 酪蛋白激酶2α; RACE; cDNA克隆;
【英文关键词】	integrin-like protein; Casein Kinase2α; RACE; cDNA cloning;
【中文摘要】	我室前期工作表明，百合花粉管质膜上存在类整合素α、β3，并可能通过介导花粉管与雌蕊基质间的相互作用调节花粉管的生长。而要进一步从分子水平上证实类整合素的存在以及研究它的功能，必须克隆其基因。根据动物整合素α、β亚基的胞质域保守序列设计简并引物，利用3′RACE的方法扩增α、β亚基的3′末端序列。实验过程中经过各种尝试与改进之后，一共扩得9个片断，测序分析表明它们均不是目的片段。在进行以上实验的过程中，有一个克隆含有引物序列，但没有按推定的阅读框阅读，BLAST比对表明它与各物种中的酪蛋白激酶(CK2)α亚基有很高的同源性。酪蛋白激酶CK2是目前发现的普遍存在于真核生物中的丝氨酸／苏氨酸型蛋白激酶，进化上具有高度的保守性并参与了多种生理功能的调控，因而克隆它的基因具有重要意义。通过5′RACE获得了CK2α的全长cDNA。接下来用两对不同的引物进行PCR反应，进一步确定了CK2α编码区序列。百合花粉管CK2αcDNA全长1480bp，含有一个999bp的开放阅读框，编码了333个氨基酸，推测的分子量为39.2KDa。GeneBank注册号为AF517838...
【英文摘要】	Our previous data suggested that the a , p 3 integrin-like proteins be present in lily pollen tube and mediate the interaction between pollen and extracellular matrix of pistil to regulate pollen tube growth. To elucidate further the presense and function of integrin-like protein ,we try to clone 3' terminus seqence of integrin-like gene from germinated pollen of lily by 3' RACE using degenerate primers corresponding to the conserved cytoplasmic regions of a and 3 subunits. However, it proved fr...

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