TGF-β1及靶向Smad3基因shRNA慢病毒对大鼠肝细胞系BRL-3A增殖的作用-中国优秀硕士学位论文全文数据库

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TGF-β1及靶向Smad3基因shRNA慢病毒对大鼠肝细胞系BRL-3A增殖的作用

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【英文题名】	Impaction on Proliferation of Rat Liver Cell Line BRL-3A Exerted by TGF-β1 or Lentivirus Expressing shRNA Trageted to Smad3 Gene
【作者】	王世美;
【导师】	邓志华; 郑素军;
【学位授予单位】	山西医科大学;
【学科专业名称】	消化内科学
【学位年度】	2011
【论文级别】	硕士
【网络出版投稿人】	山西医科大学
【网络出版投稿时间】	2011-07-27
【关键词】	TGF-β1; BRL-3A; Smad3; shRNA; 慢病毒载体; 细胞凋亡; 细胞周期; 肝再生;
【英文关键词】	TGF-β1; BRL-3A; Smad3; siRNA; shRNA; lentivirus vector; cell apoptosis; cell cycle; liver regeneration;
【中文摘要】	目的探讨TGF-β1对大鼠肝细胞系BRL-3A增殖的影响,并进一步通过靶向大鼠Smad3基因shRNA慢病毒沉默TGF-β1下游的SMAD3蛋白,再次观察BRL-3A增殖的变化,初步研究TGF-β1对BRL-3A增殖影响的作用机制,为以后设计基于TGF-β1通路、以促进肝再生为治疗目的的相应研究奠定基础。方法(1)MTT法检测TGF-β1对细胞增殖的影响：将BRL-3A细胞分为6组,分别给予不同浓度的TGF-β1(0、2、4、6、8、10ng/ml),检测各组细胞24h、36h、48h时的增殖活性；(2)进一步将BRL-3A细胞分为TGF-β1处理组和对照组,分别给予和不予TGF-β1 (8ng/ml),进行如下检测：①流式细胞仪检测两组细胞24h、36h、48h时的凋亡情况和细胞周期分布；②实时定量RT-PCR检测两组细胞24h、36h、48h时CyclinE、Cdk-2、EGF、HGF、Bcl-2、C-myc、MMP9、NF-κB基因的表达变化；(3)包装并滴定靶向大鼠Smad3基因shRNA慢病毒,以MOI=5感染BRL-3A,用实时定量RT-PCR和Western-blot分别检测Smad...
【英文摘要】	Objects Firstly to explore impaction on rat liver cell line BRL-3A proliferation exerted by TGF-β1, further use lentivirus expressing shRNA targeted to smad3 gene to silent SMAD3 of BRL-3 A,which is an important downstream protein of TGF-β1/smads pathway, then survey proliferation difference between BRL-3A and BRL-3 A infected by lentivirus again,besides study its action mechanisms preliminary, laying foundations for further studies of accelerating liver regeneration based on TGF-β1 pathway. Methods (1...
【更新日期】	2011-08-05

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