【英文题名】
Expression of Glycoprotein Genes of Goose-host Paramyxovirus Strain NA-1 in the Prokaryotic and Eukaryotic Expression Systems
【作者】
马爱霞 ;
【导师】
宣华 ;
【学位授予单位】
吉林大学 ;
【学科专业名称】
预防兽医学
【学位年度】
2008
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
吉林大学；马爱霞
【网络出版投稿时间】
2008-09-12
【关键词】
鹅源副粘病毒 ;
NA-1株 ;
糖蛋白 ;
真核表达 ;
原核表达 ;
【英文关键词】
Goose Paramyxovirus ;
Strain NA-1 ;
Glycoprotein ;
Eukaryotic expression ;
Prokaryotic expression ;
【中文摘要】
本研究将本实验室分离、鉴定并纯化的鹅源副粘病毒NA-1株进行了基因组RNA的提取,参考GenBank收录的ZJ1株鹅源副粘病毒全基因组核苷酸序列,设计2对特异性引物,通过RT-PCR方法分段扩增了F、HN基因核苷酸序列。
本研究构建原核表达质粒pET-F、pET-HN,并分别转化表达菌DE3,通过IPTG的诱导表达,将表达蛋白进行SDS-PAGE检测,用全病毒高免血清进行Western blot检测,出现特异性条带。
本研究构建真核表达质粒pCI-F、pCI-HN,将其分别转染Vero细胞,经G418筛选后,进行间接免疫荧光试验出现特异性绿色荧光,说明真核表达质粒能够表达F、HN蛋白;表达蛋白用全病毒高免血清进行Western blot检测,出现特异性条带。
说明表达的F、HN蛋白具有良好的反应原性,为高效的亚单位基因工程苗的研制、新型诊断方法的建立及鹅源副粘病毒基因组融合功能的研究奠定基础。
【英文摘要】
Newcastle disease(ND),caused by Newcastle disease virus(NDV), is an acute and highly contacted contiguous disease mainly infecting avian. ND is classified as a violent contagion by OIE. NDV is a member of the genus Paramyxovirinae,order Paramyxoviridae. NDV is a negative RNA virus with envelop. It exists in various tissues, eg. apparatus, body fluid, secretion, and excrement. ND is a serious avian disease in the worldwide. ND causes severe economic losses in the poultry indusity. Avian Paramyxovirus ...
【更新日期】
2008-10-09
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