【英文题名】
Preparation of SP Ion Exchange Media and Its Application in the Purification of Recombinant Human Lactoferrin
【作者】
白倩 ;
【导师】
马润宇 ;
【学位授予单位】
北京化工大学 ;
【学科专业名称】
微生物与生化药学
【学位年度】
2010
【论文级别】
硕士
【网络出版投稿人】
北京化工大学
【网络出版投稿时间】
2010-09-07
【基金】
国家自然科学;
【关键词】
离子交换介质 ;
烯丙基活化 ;
配基偶联 ;
重组人乳铁蛋白 ;
抑菌活性 ;
【英文关键词】
ion exchange adsorbents ;
allyl activation ;
coupling ligand ;
recombinant human lactoferrin ;
antimicrobial activity ;
【中文摘要】
乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)是一种高附加值的药用蛋白质,人乳中含量较高,但因人乳来源有限,严重限制了其商业化应用。随着转基因技术的突飞猛进,LF已经在重组牛乳腺生物反应器中得到了高效表达。为了有效地利用该重组蛋白,本文首先采用进口SP离子交换介质为层析介质,建立了乳腺生物反应器表达的重组人乳铁蛋白分离纯化的规模化生产工艺,分离纯化工艺由牛奶预处理(Milk pretreatment)、离子交换层析(Ion Exchange Chromatography, IEC)、超滤脱盐(Ultrafiltration desalting)、冻干(Freeze drying)等步骤组成。批次处理量为200L重组人乳铁蛋白牛奶,工艺所得产品约600g纯品重组人乳铁蛋白,电泳及高效液相检测纯度大于95%。但是,由于本工艺采用价格高昂的进口离子交换介质,因此生产成本较高,限制了重组乳铁蛋白的应用。
为了降低纯化工艺生产成本,本文以国产的快流速琼脂糖凝胶为基质合成了不同配基密度的SP离子交换介质,并成功应用于重组人乳铁蛋白的分离纯化。在琼脂糖凝胶活化步骤中,考察了烯丙基缩水甘油醚加入量、Na...
【英文摘要】
Lactoferrin (LF) is a valuable pharmaceutical protein abundant in human milk. Although the limited source of human milk hampered its commercial application, the advancements in recombinant technology have made it possible to express human lactoferrin (HLF) efficiently in cattle mammary bioreactor. Therefore, an efficient purification process of recombinant HLF (rHLF) from transgenic milk must be established. In this study, scale-up chromatographic purification of rHLF from transgenic milk was achiev...
【更新日期】
2010-09-28
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