分子生物学等生物技术的快速发展,为中药的研究开辟了许多新的途径。其中,应用小分子量中药活性成分的单克隆抗体(monoclonal antibodies,MAbs)建立的免疫测定系统已成为受体结合分析、酶测定等研究的一个重要工具,也是药用植物的一种定性定量分析技术,这些都与MAbs的特异亲和力、可大量生产等相关。但是,单克隆抗体用于现代中医药的研发方面的文献至今尚所见不多,因此,亟需探索有关单抗技术在中医药研究中的技术基础及其应用。
本研究的目的就是通过制备芍药的主要活性成分一芍药苷(paeoniflorin,PF)的单克隆抗体,从而建立以此为基础的酶联免疫测定(enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA)方法,对尘药和方剂中的芍药苷进行定量分析。内容主要包括人工抗原的合成与鉴定、动物免疫及细胞融合、抗体筛选与纯化、MAbs性质测定、利用制成的单抗建立ELISA方法及其验证等。
首先采用高碘酸钠法将PF分别与人血清白蛋白(albumin human serum,HSA)或鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)结合形成偶联物PF-HSA、...
【英文摘要】
Immunoassay systems using monoclonal antibodies(MAbs) against naturally occurring bioactive compounds having lower molecular weights have become one of important tools for the studies on receptor binding analysis,enzyme assay,and qualitative and/or quantitative analysis techniques in herbal medicines owing to their specific affinity.However,there are not many reports and references about the applications of MAbs in the tranditional Chinese medicine(TCM) reserches. Therefore,it is necessarily urgent ...
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