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RNA干扰和合成小分子对大肠杆菌外排泵抑制作用研究  
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【英文题名】 RNAi and Micromolecules Inhibit the Multidrug Efflux Pump of Escherichia Coli
【作者】 曾博;
【导师】 王红宁;
【学位授予单位】 四川农业大学;
【学科专业名称】 生物化学与分子生物学
【学位年度】 2008
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 四川农业大学
【网络出版投稿时间】 2008-12-08
【基金】 “十一五”国家科技支撑计划;
【关键词】 大肠杆菌; 外排泵; AcrAB-TolC; RNA干扰; 抑制剂;
【英文关键词】 Escherich.coli; Efflux pump; AcrAB-TolC; RNAi; Inhibitor;
【中文摘要】 本研究分别采用RNA干扰技术和合成吲哚类小分子抑制剂的方法,研究大肠杆菌主动外排泵AcrAB-TolC对大肠杆菌耐药性的影响。 通过对临床分离480株猪源大肠杆菌进行药敏实验初步筛选耐药菌株,使用氯霉素、四环素和氨基糖苷类3类抗生素耐药基因PCR试剂盒进行联合检测,筛选出耐药菌株Fj307。使用氯霉素对ATCC25922进行人工诱导耐药性,获得耐药菌株YD02。实验通过MIC检测和耐药基因PCR检测,确认该2株菌存在外排泵AcrAB-TolC引起的耐药性。 以大肠杆菌AcrAB-TolC外排系统中膜融合蛋白AcrA蛋白为干扰目标,针对其编码基因序列设计合成了4对siRNA干扰分子:siRNA_35、siRNA_164、siRNA_929,siRNA_control通过生长抑制实验从表观水平检测该4对siRNA抑制外排泵活性的能力,干扰结果显示:在干扰实验进行中7h～10h间时,在3种氯霉素浓度梯度下128、64、32(ug/mL)均能检测出各siRNA实验组和对照组间的吸光度数据存在差异(P＜0.01),实验对氯霉素浓度32ug/mL实验组进行统计分析,5个不同实验处理的吸光度...
【英文摘要】 This research work used RNA interference technology and synthesized Micromolecules of Indole derivatives as our two major methods,study on their influence in AcrAB-TolC directed and efflux-mediated multidrug resistance in Escherichia coli. We tested the Drug Sensitivity in 480 clinical strains of E.coli from pigs,chose the multiresistant ones.then,use three kind of antibiotic(Chloramphenicol, Tetracycline,Aminoglycosidc) resistant gene PCR Kit to check,and select efflux-mediated multidrug resist...
【更新日期】 2009-01-13

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导师：王红宁    导师单位：四川农业大学    学位授予单位：四川农业大学
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