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RNA干扰沉默食管鳞癌细胞HIF-1α基因对血管生成拟态相关基因表达的影响  
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【英文题名】 The Effect of RNAi Targeting HIF-1α Gene on the Expression of Vasculogenic Mimicry Associated Genes in Esophageal Squamous Cancer Cells
【作者】 华杰;
【导师】 施瑞华;
【学位授予单位】 南京医科大学;
【学科专业名称】 内科学
【学位年度】 2008
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 南京医科大学
【网络出版投稿时间】 2008-10-31
【关键词】 食管肿瘤; 细胞缺氧; 缺氧诱导因子1-α亚基; RNA; 小分子干扰; 血管生成拟态;
【英文关键词】 ESCC(esophageal squamous cancerous cell); Hypoxia; Hypoxia inducible factor 1-alpha subumit (HIF-1α); Small interfering RNA; VM (vasculogenic mimicry);
【中文摘要】 目的: 利用RNA干扰技术沉默HIF-1α基因,构建稳定表达沉默HIF-1α的食管鳞癌Eca-109细胞株,分别常氧、缺氧条件下研究RNA干扰对人食管鳞癌细胞Eca-109中HIF-1α基因及血管生成拟态相关基因的抑制效应。 方法: 1、用不同缺氧时间(0、12、24、36、48、60、72、96h)分别缺氧培养食管鳞癌细胞Eca-109(缺氧培养箱中混合气体浓度为5%CO_2、85%N_2、10%H_2),以Western blotting法检测细胞中HIF-1α蛋白的表达变化,选择可以引起HIF-1α蛋白表达增加的适当的缺氧培养时间。 2、选择四组细胞进行培养:1组为食管鳞癌细胞Eca-109,2～4组为RNA干扰HIF-1α基因后筛选出的稳定传代的3株细胞(分别为H2/20、H3/10、H3/15号细胞,由本实验室编号保存),采用缺氧培养24h,以Western blotting和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α蛋白及mRNA表达,同时Western blotting检测上皮细胞激酶(EphA2)、血管上皮钙粘附素(VE-cadher...
【英文摘要】 Objective: To investigate the effect of siRNA targeting HIF-1αgene on the expression of vasculogenic mimicry associated genes in esophageal squamous cancer cells. Methods: 1.Esophageal Squamous Cancer Cells Eca-109 were routine cultured under hypoxia condition.And for the culture under hypoxia condition we arranged different time(0,12,24,36,48,60,72,96h).The expression of HIF-1αprotein was detected by Western blotting,and we selected a proper culture time as the most suitable culture c...
【更新日期】 2008-11-21

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导师：施瑞华    导师单位：南京医科大学第一附属医院消化科    学位授予单位：南京医科大学
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