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离子特异性DNA酶应用于人体全血铅检测的方法学建立及评价  
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【英文题名】 Establishment of a Novel DNAzyme Sensor for Detecting Lead in Blood and Methodology Evaluation
【作者】 聂志扬;
【导师】 郭健;
【学位授予单位】 北京协和医学院;
【学科专业名称】 临床检验诊断学
【学位年度】 2011
【论文级别】 硕士
【网络出版投稿人】 北京协和医学院
【网络出版投稿时间】 2011-09-27
【关键词】 核酸酶传感器; 铅离子特异性DNA酶; 血铅; 石墨炉原子吸收法;
【英文关键词】 DNAzyme sensor; Pb dependent DNAzyme; blood lead; isotope dilution mass spectrometry;
【中文摘要】 目的建立基于新型核酸酶传感器(铅离子特异性DNA酶)的血铅检测体系,并对该体系应用于临床检测进行方法学评价。 方法 一、离子特异性DNA酶检测人体全血铅方法的建立 全血样本经聚乙二醇辛基苯基醚处理使红细胞裂解,依次使用蛋白酶K消化、硝酸及三氯乙酸处理后使蛋白消化沉淀,铅元素以二价离子形式释放至反应溶液中。溶液中的铅诱导铅离子特异性DNA酶切割荧光基团和淬灭基团释放荧光信号。荧光增长速率与铅离子浓度成正比。以标准铅溶液制作标准曲线,确定检测线性范围,测定血铅标准物质以评价准确度、精密度及回收率。铅离子特异性DNA酶应用于临床全血铅检测的方法学比较研究 选择44例临床全血样本,分别采用石墨炉原子吸收光谱法和铅离子特异性DNA酶法检测血铅含量,对两种检测方法得到的数据分析处理,评价其相关性。 结果 一、铅离子特异性DNA酶检测人体全血铅方法的建立 成功建立铅离子特异性DNA酶测定全血铅的样本前处理方法及检测体系。检测线性范围良好(0-2000nmol/L,r2=0.9988),方法检出限2.20nmol/L。血铅标准物质检测的准确度及精密度良好,...
【英文摘要】 Objective To develop a method for detecting lead in blood by a novel DNAzyme sensor (Pb dependent DNAzyme). Methods 1. Establishment of a novel method for detecting lead in blood based on Pb dependent DNAzyme. Blood samples were pretreated with Triton X-100, and the protein in blood samples were digested or removed by Proteinase K, nitric acid and TCA in turn, which results a release of Pb icon. Then after adjusting pH to neutral, pretreated blood sample was mixed with substrate strand and en...
【更新日期】 2011-11-09

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