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甘蔗ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建  
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【英文篇名】 Cloning of ACC Oxidase Gene in Sugarcane and the Construction of Its Plant Expression Vector
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【作者】 董伟清; 王爱勤; 韦波; 何龙飞; 杨丽涛; 李杨瑞;
【英文作者】 DONG Wei-qing et al(Department of Plant Science of Agronomy College; Guangxi University; Nanning; Guangxi 530005);
【作者单位】 广西大学农学院植物科学系; 广西壮族自治区药用植物园; 广西农业科学院作物改良与生物技术重点开放实验室 广西南宁; 广西南宁530005广西农业科学院作物改良与生物技术重点开放实验室; 广西南宁;
【文献出处】 安徽农业科学 , Journal of Anhui Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2008年 17期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 甘蔗; ACC氧化酶; 基因克隆; 植物表达载体;
【英文关键词】 Sugarcane; ACC oxidase; Gene cloning; Plant expression vector;
【摘要】 [目的]为甘蔗的基因工程育种提供理论基础和技术储备。[方法]从甘蔗嫩叶中提取总RNA,根据GenBank中甘蔗ACC氧化酶cDNA序列设计2对引物,利用RT-PCR技术扩增甘蔗ACO cDNA序列。构建甘蔗ACO cDNA正义植物表达载体和反义植物表达载体,并利用含ACC氧化酶基因的植物重组表达载体转化根癌农杆菌感受态细胞。[结果]从甘蔗嫩叶中提取总RNA的OD260/OD280为1.90,说明提取RNA完整性好、纯度高,完全可满足cDNA逆转录的要求。所获得的甘蔗ACC氧化酶cDNA序列全长为969bp,与GenBank中甘蔗ACOcDNA的核苷酸序列同源性为98.6%,氨基酸序列同源性为97.5%。成功构建了正义植物表达载体pBIaco和反义植物表达载体pBIantiaco,并将其导入根癌农杆菌EHA105中。[结论]该研究为研究该基因的功能和培育甘蔗转基因新种质资源奠定了基础。
【英文摘要】 [Objective] The research aimed to provide the theoretical basis and the technical reserve for the genetic engineering breeding of sugarcane.[Method] Total RNA was extracted from tender leaves of sugarcane.Two pairs of primers were designed according to cDNA sequence of ACC oxidase(ACO) on GenBank website to amplify ACO cDNA sequence in sugarcane.The sense and antisense plant expression vectors of ACO cDNA in sugarcane were constructed.And the recombined plant expression vectors containing ACO gene was used ...
【基金】 广西省科学基金(桂科青0640003); 广西省农科院博士后基金(桂财教函[2005]205号)
【更新日期】 2008-08-07
【分类号】 S566.1;Q943.2
【正文快照】 乙烯作为一种气态植物激素,参与了种子萌发至成熟的一系列生命活动的调节,与植物花、果的成熟和衰老有着密切的关系[1],是目前植物生长发育调控机制的研究热点之一。乙烯在植物中的生物合成途径为:甲硫氨酸→S-腺苷甲硫氨酸(SAM)→1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)→乙烯[2]。其中,ACC

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