人红白血病K562细胞基因表达谱芯片制作及应用研究-中国博士学位论文全文数据库

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人红白血病K562细胞基因表达谱芯片制作及应用研究

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【英文题名】	Study on Fabrication and Application of Gene Expression Profile Microarray of Human Leukemia K562 Cell
【作者】	祝骥;
【导师】	姚汝华; 马文丽;
【学位授予单位】	华南理工大学;
【学科专业名称】	发酵工程
【学位年度】	2002
【论文级别】	博士
【网络出版投稿人】	祝骥
【网络出版投稿时间】	2005-09-01
【关键词】	限制性显示PCR; K562细胞; 基因芯片; 基因表达谱; 细胞分化;
【英文关键词】	Restriction display PCR(RD-PCR); K562 cell; Gene chip; Gene expression profile; Cell differentiation;
【中文摘要】	K562细胞是一株具有多方向分化潜能的人红白血病细胞系,可在多种化学诱导剂,如高铁血红素、羟基脲等的作用下向红细胞方向分化,是一个很好的研究肿瘤化学治疗及细胞分化的模型。基因芯片技术则是近年来分子生物学与微电子学等多学科交叉融合而成的、能够进行高通量基因表达研究的最新手段,主要包括大量cDNA片段的制备,载体介质的选择与表面处理,cDNA点阵的打印,样品标记与分子杂交,以及芯片扫描与信息分析等内容。本文对K562细胞基因表达谱芯片的制作及应用该芯片对药物诱导K562细胞分化过程中基因表达变化进行了系统研究,结果如下: 1.基因表达谱芯片制作的首要问题是快速获取大量的cDNA探针。本研究以人红白血病K562细胞为材料,根据限制性显示PCR技术,建立了两种cDNA探针制备的新方法。一是对逆转录合成的cDNA进行限制性分组PCR扩增后,直接进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,并用核酸银染技术显示DNA条带,然后从凝胶上切下相应的条带,进行二次PCR大量扩增及纯化后作为基因芯片探针。二是将限制性分组PCR扩增产物同T载体连接,转化大肠杆菌,建立限制性分组cDNA文库。然后从文...
【英文摘要】	K562 cell is a pluripotential human erythroleukemia cell line that can be induced by a number of chemical agents such as hemin and hydroxyurea to undergo erythroid differentiation. The cell line remains an attractive model for the study of cancer chemotherapy and cell differentiation.Gene chips or DNA microarrays technology, which arises in recent years and intercrosses molecular biology, micro-electronics and other disciplines, is a powerful tool for analyzing hundreds and thousands of genes simultaneously...
【更新日期】	2005-10-14

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