【英文题名】
Cloning and Expression of Fibrinolytic Enzyme Genes
【作者】
肖璐 ;
【导师】
张义正 ;
【学位授予单位】
四川大学 ;
【学科专业名称】
遗传学
【学位年度】
2005
【论文级别】
博士
【网络出版投稿人】
四川大学
【网络出版投稿时间】
2005-10-08
【关键词】
解淀粉芽孢杆菌 ;
豆豉溶栓酶 ;
藤黄微球菌 ;
藤黄微球菌溶栓酶 ;
淀粉酶基因 ;
枯草杆菌 ;
果聚糖蔗糖酶基因 ;
基因克隆 ;
基因表达 ;
【英文关键词】
Bacillus amyloliquefaciens ;
Douchi fibrinolytic enzyme(DFE) ;
Micrococcus luteus ;
Micrococcus luteus fibrinolytic enzyme(MLFE) ;
α -amylase gene ;
Bacillus subtilis ;
levansucrase gene ;
gene cloning ;
gene expression ;
【中文摘要】
通过纤维蛋白平板筛选、纤溶活性测定和体外溶栓分析相结合的方法,成功地从环境中筛选到一株纤溶活性较高的细菌菌株。利用细菌分类鉴定方法对其形态和生理生化特征进行了研究,发现其与藤黄微球菌的特征相符。根据细菌16S rDNA的保守序列设计1对引物,采用PCR技术扩增出该菌的16S rDNA片段,对该序列克隆后测序,并与已报道的序列进行比对,结果表明:它与藤黄微球菌的16S rDNA序列的同源性高达99%。此结果进一步表明,该菌在系统分类学上属于微球菌属(Micrococcus Cohn)藤黄微球菌(Micrococcus luteus),将其命名为ML-909。
根据解淀粉芽孢杆菌的豆豉溶栓酶(DFE)全基因、前肽-成熟肽(proDFE)序列、成熟肽编码序列设计3对引物,以ML-909菌株的总DNA为模板进行PCR扩增,扩增结果表明,从ML-909 DNA中扩增出编码成熟肽的DNA片段。测序结果显示,该片段大小为828bp,与豆豉溶栓酶(DFE)成熟肽基因片段大小完全相同,同源性达到99%,仅有2个碱基的差异,并导致1个氨基酸的变异。该序列编码由275个氨基酸残基组成的酶蛋白,命名为藤黄微...
【英文摘要】
A strain, producing a fibrinolytic enzyme, was isolated from the environment and its morphorlogical, physiological and biochemical characteristics were studied. Results showed that most of these characteristics were very similar to those of Micrococcus luteus. The 16s rDNA sequence of the strain was also determined and compared with those in the GenBank.Its nucleotide sequence shares 99% identity with 16s rDNA of Micrococcus luteus. From the polyphasic taxonomical view, the strain belongs to Micrococcus Coh...
【更新日期】
2006-02-16
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