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基因干扰肝肠钙黏附蛋白联合p53分子靶向治疗肝癌的实验研究     在线阅读　整本下载　分章下载　分页下载 本系统暂不支持迅雷或FlashGet等下载工具
【英文题名】 Lentivirus-mediated LI-cadherin RNAi Combined with rAd-p53 Molecular Targeted Therapies in Hepatocellular Carcinoma
【作者】 刘凌晓;
【导师】 王建华; 王小林; 颜志平; JM Luk;
【学位授予单位】 复旦大学;
【学科专业名称】 影像医学与核医学
【学位年度】 2008
【论文级别】 博士
【网络出版投稿人】 复旦大学
【网络出版投稿时间】 2009-01-12
【关键词】 基于miR30的发夹结构RNA; 慢病毒; 肝肠钙黏附蛋白; 肝细胞癌; 基因干扰; 癌基因; 基于miR30的发夹状RNA; Wnt/β-catenin信号通路; 生物学属性; 重组腺病毒携带P53; 联合分子靶向治疗;
【英文关键词】 miR-30-based shRNA; Lentivirus; Ll-cadherin; hepatocelluar carcinoma; RNA interference; oncogene; hepatocellular carcinoma; Wnt/β-catenin signaling pathway; biological properties; rAd-p53; combined molecular targeted therapies;
【中文摘要】 第一部分靶向肝肠钙黏附蛋白miR-30-based shRNA慢病毒的构建、鉴定及大量包装 目的: 以Ll-cadherin基因为靶标设计miR-30-based shRNA序列,构建重组慢病毒,用以研究肝肠钙黏附蛋白在肝癌生长和转移过程中的作用,并为基因干扰治疗肝癌的动物实验提供工具。 方法: 参照冷泉港实验室设计的miR-30-based shRNA系列库,采用Openbiosystem公司定制的以逆转录病毒为基本骨架,确认有效干扰靶基因和对照基因的PSM2系列载体,由PSM2质粒PCR制备携带miR-30-basedshRNA序列的插入片段,再提纯浓缩测序后与慢病毒线性质粒连接,构建重组pLUNIG-miLl-cadherin工作质粒。同时重组构建干扰荧光素酶基因pLUNIG-miLuciferase工作质粒作为非靶基因干扰对照。采用四质粒包装系统,重组pLUNIG-miLl-cadherin或pLUNIG-miLuciferase为工作质粒,PCMV-VSVG、PMDL-G/P-RRE、PRSV-REV为包装质粒,用磷酸钙-DNA共沉淀法转入293T细胞中包装...
【英文摘要】 PartⅠEstablishment,characterization and package of miR-30-based shRNA lentivirus targeted at LI-cadherin Purpose: The study designed the miR-30-based shRNA sequence targeted at LI-cadherin gene and packaged the recombinant lentivirus to study the role of LI-cadherin in the growth and metastasis of HCC. Materials and Methods: Based on miR-30-based shRNA library of Cold Spring Harbour carried by the PSM2 vector,the pLUNIG-miLI-cadherin as the recombinant working plasmid and pLUNIG-miLuci...
【更新日期】 2009-02-16

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