由于石油的过度消耗,地球正面临石油资源日益枯竭、原油价格不断攀升、温室气体进一步提高的境况。“低碳经济”正在世界范围内进一步强化实施,加上人们对绿色生物基产品的偏爱,利用产乙醇菌代谢生物质资源转化为乙醇的微生物发酵法日益受到关注。嗜热厌氧杆菌能够代谢生物质中的大部分糖产乙醇而受到推崇,为继续提高其乙醇发酵特性,本课题采用同源重组的方式,沉默了其主要的枝路乳酸脱氢酶,敲除了乳酸代谢途径基因,构建了嗜热厌氧杆菌工程菌Δldh,采用纤维床反应器(Fibrous bed bioreactor)固定化Δldh突变株发酵木薯渣和甘蔗渣廉价生物质,发展生物发酵法生产燃料乙醇的新工艺。以长期外加乙醇胁迫的方式,提高了Δldh突变株的乙醇耐受性,增强了乙醇发酵能力。
基于乳酸脱氢酶序列JW/SL-YS485-AY 278026设计上下游同源片段的引物,以嗜热厌氧杆菌基因组为模板,成功扩增到了乳酸脱氢酶俩同源片段(ldh-up和ldh-down)。以pBLUESCRIPT II SK(+)为基础质粒,化学合成耐热的红霉素抗性基因为筛选标记,把同源片段分别连接在抗性标记的上下游,成功构建打靶载体。对已经用异烟肼弱化了细胞壁...
【英文摘要】
The global earth is under the status of accelerating depletion of oil resources, rising price of crude oil and enhancing greenhouse gases, resulting from the over-consumption of petroleum-derived transportation fuels.“Low Carbon Economy”is further emphasized and implemented all over the world, together with strong preference on green bio-based products by consumers. It is thus increasing interest to produce bioethanol from fermentation with biomass resources. Thermophilic anaerobic bacteria are of applied i...
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