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绵羊肺腺瘤病毒NM株囊膜(env)基因的定向克隆与融合表达
CLONING AND FUSION EXPRESSION OF ENV GENE OF JAAGSIEKTE SHEEP RETROVIRUS NM STRAIN
【机构】 内蒙古农业大学；
【摘要】 根据JSRV-NM株基因组全序列,设计一对包含env基因在内的引物,并分别在5‘端设计HindⅢ和BamH Ⅰ酶切位点,利用PCR技术扩增env基因,通过连接反应将其克隆于pET-30b表达载体上。序列分析表明env基因全长1836bp,编码612个氮基酸残基,构建表达重组质粒env-pET-30b,转化E.eoli BL21,经IPTG于37℃诱导培养,SDS-PAGE电泳分析表明,表达的env基因融合蛋白分子量约为69kDa。本试验成功表达env基因融合蛋白为进一步研究该蛋白的生物学特性,搞清绵羊肺腺瘤病的发病机理,建立准确的临床诊断方法奠定基础。
【关键词】 绵羊肺腺瘤病毒囊膜(env)基因；
定向克隆；
融合表达；
【基金】 国家自然科学基金资助项目(批准号 30260083);内蒙古自治区重点领域资助项目(批准号 ZL9903)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会
- 【会议时间】2005-08
- 【会议地点】中国呼和浩特
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会兽医病理学分会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会