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稻瘟病菌SSR反应体系的优化

Optimization of SSR Reaction System of Pyricularia grisea

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【作者】 臧威张兰兰张国民李柱刚张淑园孙剑秋严善春

【Author】 Zang Wei1,3, Zhang Lanlan3, Zhang Guomin2, Li Zhugang2, Zhang Shuyuan3,Sun Jianqiu1,3, Yan Shanchun1 (1College of Forestry, Northeast Forestry University, Harbin 150040; 2College of Agricultural Science in Heilongjiang, Harbin 150086; 3College of Life Science and Engineering, Qiqihar University, Qiqihar 161006)

【机构】 东北林业大学林学院齐齐哈尔大学生命科学与工程学院黑龙江省农业科学院东北林业大学林学院 哈尔滨150040齐齐哈尔大学生命科学与工程学院齐齐哈尔161006哈尔滨150086哈尔滨150040齐齐哈尔大学生命科学与工程学院哈尔滨150040

【摘要】 稻瘟病菌SSR检测是分子标记辅助育种的一项重要技术。为优化SSR反应体系,以稻瘟病菌菌株504为供试材料,采用单因素筛选法及L9(34)正交试验设计,研究了稻瘟病菌SSR分析中PCR反应体系的主要成分对扩增结果的影响。结果表明:在总体积为20μl的PCR反应中,TaqDNA聚合酶的最适用量为1.0U;Mg2+、dNTP和引物的最适终浓度分别为1.0mmol/L、100μmol/L和0.4μmol/L。利用该体系进行扩增,所得谱带清晰、稳定、非特异性带少。

【Abstract】 SSR detection is an important technique of molecular marker for assisted breeding in Pyricularia grisea. In order to optimize SSR-PCR reaction system, the main factors affecting amplication results were studied with single factor selection and L9(34) orthogonal design. The results showed that the optimal reaction system was as follows: the 20μl reaction system contained TaqDNA polymerase 1.0U, Mg2+ 1.0 mmol/L, dNTP 100 μmol/L and Primer 0.4μmol/L. Using this system, amplication bands were clear, standard and non-especial bands were shorter.

【关键词】 稻瘟病菌SSR体系优化
【Key words】 Pyricularia griseaSSRSystem optimization
  • 【文献出处】 中国农学通报 ,Chinese Agricultural Science Bulletin , 编辑部邮箱 ,2007年06期
  • 【分类号】S435.111.41
  • 【被引频次】18
  • 【下载频次】121
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