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B3HM细胞免疫小鼠脾细胞scFv噬菌体展示文库的构建及表达  
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【英文篇名】 The Construction and Expression of Phage Display scFv Library from the Spleen Cells of Mice Immunized With B3HM Cells
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 许静; 张磊; 刁世勇; 刘斌; 孟磊; 姜学英; 韩忠朝;
【英文作者】 XU Jing ZHANG Lei DIAO Shi-yong LIU Bin MENG Lei JING Xue-ying HAN Zhong-chao(State Key Laboratory of Experimental Hematology; Institute of Hematology; CAMS & PUMS; Tianjin 300020; China);
【作者单位】 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室 天津;
【文献出处】 中国生物工程杂志 , China Biotechnology, 编辑部邮箱 2007年 07期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 B3HM细胞; 噬菌体展示; 抗体库; 单链抗体;
【英文关键词】 B3HM cell Phage display Antibody library Single chain antibody;
【摘要】 目的:利用噬菌体展示技术构建B3HM细胞免疫小鼠的脾细胞表达scFv文库。方法:用人骨髓细胞系B3HM细胞免疫小鼠,取其脾细胞采用RT-PCR方法扩增VH和Vk基因并克隆入噬菌体展示表达载体,构建scFv文库,测定文库的库容量,BstNI酶切单克隆分析文库的多样性,对文库进行富集检测,鉴定单克隆噬菌体与B3HM细胞结合反应。结果:文库的库容为5×106cfu,单克隆的BstNI酶切图谱显示多样性,单克隆噬菌体抗体与B3HM细胞呈阳性反应。结论:噬菌体展示文库的成功构建为寻找新的致白血病相关基因,阐明白血病发病机理奠定了基础。
【英文摘要】 To construct a scFv library by phage display technique from the spleen cells of mice immunized with B3HM cells. Three mice were immunized with B3HM cells, and their spleen cells were harvested. The genes of VH and Vk were amplified by RT-PCR from the cDNA of the immunized spleen cells and a scFv-phage display antibody library was constructed. The capacity of library was measured,and the variety of the library was analyzed by digesting with restriction endonuclease BstNI.ScFv phage clones were randomly picke...
【基金】 国家自然科学基金资助项目(39870291)
【更新日期】 2007-08-13
【分类号】 R392.11
【正文快照】 抗体是分离新基因和研究基因功能的极为有效的探针和手段。单链抗体(single chain antibody,scFv)是抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)由一个连接肽首尾相连组成的单一肽链,具有分子量小,组织穿透力强,体内清除快,易于大肠杆菌发酵生产和进行基因工程改进等优点。噬菌体展示?

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