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用甲基化修饰法抑制钝顶螺旋藻遗传转化中限制性内切酶对外源质粒的降解

Methylating the foreign plasmids on Spirulina/Arthrospira platensis transformation to resist the restriction endonuclease digestion

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【作者】 王迪卢永忠张学成茅云翔隋正红

【Author】 WANG Di,LU Yong-zhong,ZHANG Xue-cheng,MAO Yun-xiang,SUI Zheng-hong(College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,Qingdao 266003,China)

【机构】 中国海洋大学海洋生命学院中国海洋大学海洋生命学院 山东青岛266003山东青岛266003

【摘要】 胞内限制性内切酶降解外源DNA,是钝顶螺旋藻/节旋藻(Spirulina/Arthrospira platensis)遗传转化的难点之一。通过用EDTA螯合Mg2+抑制限制性内切酶活性的方法,对外源质粒进行了甲基化修饰。结果表明,修饰后的外源质粒可抵抗限制性内切酶3h的降解,有利于钝顶螺旋藻的遗传转化。

【Abstract】 The active restriction endonuclease of Spirulina/Arthrospira platensis is believed to be the most serious barrier of the foreign gene transformation.With EDTA chelating Mg2+,we methylate the foreign plasmids by using the crude extracts of cells.Results show that the foreign plasmids can resist the digestion of restriction endonuclease for three hours,and the methylated plasmids are better than unmethylated plasmids for transformation.

【基金】 国家自然科学基金资助项目(30471317)
  • 【分类号】Q943.2
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