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高效制备双元细菌人工染色体(BIBAC)载体DNA的研究

Research on Efficient Preparation of Binary Bacterial Artificial Chromosome (BIBAC) Vector DNA

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【作者】 成志伟曹筑荣李磊邢俊杰罗赫荣王正华陈良碧曹孟良

【Author】 CHENG Zhi-wei1,2,CAO Zhu-rong2,3,LI Lei2,4,XING Jun-jie2,LUO He-rong4,WANG Zheng-hua3,CHEN Liang-bi1,CAO Meng-liang2(1.College of life Science,Hunan Normal University,Changsha 410081,China;2.China National Hybrid R & D Center,Changsha 410126,China;3.College of Computer,National University of Denfense Technology,Changsha 410001,China;4.College of Agricultural Science,Hunan Province,Changsha 410125,China)

【机构】 湖南师范大学生命科学学院国家杂交水稻工程技术研究中心湖南省农业科学院国防科技大学计算机学院国家杂交水稻工程技术研究中心 中国长沙410081中国长沙410125中国长沙410001中国长沙410081

【摘要】 高质量的BIBAC载体DNA的制备受到酶切、脱磷等许多因素的影响,是构建BIBAC文库的关键步骤之一.以BIBAC2载体为材料,对其进行了BamHI限制性酶切和CIAP脱磷,制备了可用于进一步构建文库的线性载体.在此基础上确定了适宜的酶量、酶切时间、脱磷酶的用量及失活等步骤的反应条件.

【Abstract】 Preparation of high purified vector DNA,which is a key step in BIBAC library construction,is affected by a series of factors including digestion of restriction enzyme and dephosphorylation of linearized vector DNA.In our study,high quality of vector DNA for construction of BAC library was prepared after the BIBAC vector was digested by the restriction enzyme of BamH I and dephosphorylation by CIAP with the modified conditions including optimal concentration of restriction enzyme,optimal digestion time,optimal concentration of dephosphatase and optimal treatment of dephosphatase inactivity.

【基金】 农业部跨越计划项目(超级稻分子育种);湖南省省级重点实验室科研项目(05FJ4035);中国博士后基金资助项目(2005037696)
  • 【文献出处】 湖南师范大学自然科学学报 ,Journal of Natural Science of Hunan Normal University , 编辑部邮箱 ,2007年01期
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】220
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