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微生物基因组DNA氯化苄提取方法优化的研究

Modified extracted method for genomic DNAs from microbe using benzyl chloride

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【作者】 孙小丁郑彦杰张苓花王运吉

【Author】 SUN Xiao-ding,ZHENG Yan-jie,ZHANG Ling-hua*,WANG Yun-ji(Department of Biology and Food Engineering,Dalian Institute of Light Industry,Dalian 116034,China)

【机构】 大连轻工业学院生物与食品工程学院大连轻工业学院生物与食品工程学院 辽宁大连116034辽宁大连116034

【摘要】 以PichiapastorisGS115为例,通过正交设计对氯化苄提取基因组DNA条件进行优化,并获得最优水平组合提取条件:提取液pH9、氯化苄加量300μL、保温时间60min。以PichiapastorisGS115的基因组DNA为模板,PCR扩增泛素基因(Ubi)在琼脂糖凝胶电泳228bp处出现DNA亮带。利用该法提取其他微生物基因组DNA也能够获得很好的结果。

【Abstract】 In this paper,conditions for extracting genomic DNAs from Pichia pastoris GS115 using benzyl chloride was optimized by orthogonal test.The optimum conditions were: pH 9.0,adding 300 μl benzyl chlorides and keeping temperature for 60 min.After PCR was operated using the isolated genomic DNAs of Pichia pastoris GS115 as template and using a double of specific primers,a 228 bp segment of Ubi was obtained.

【关键词】 基因组DNA氯化苄微生物
【Key words】 genomic DNAsbenzyl chloridemicrobe
  • 【分类号】Q933
  • 【被引频次】8
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