P53亚细胞定位变化对POLD1基因启动子活性的影响

【摘要】 POLD1基因编码DNA聚合酶δ(pol δ)的催化亚基．体外实验表明p53能够抑制POLD1 基因启动子活性．文中探讨p53是否在细胞内直接与POLD1启动子结合调节POLD1基因表达．在瞬时转染pEGFP-p53重组质粒的人乳腺癌MCF7细胞中,p53表达增强;RT-PCR结果显示 POLD1基因mRNA表达受到抑制．染色体免疫共沉淀和荧光素酶报告基因实验证明p53在细胞内与POLD1启动子直接结合抑制其启动子活性．荧光显微镜观察发现EGFP-p53在G1期进入细胞核而在S期和G2期则被转运至细胞质．在稳定表达的pEGFP-p53细胞系中,细胞周期同步化后POLD1启动子活性在细胞周期各时相均处于较低水平．证明了细胞内p53高表达后通过直接与 POLD1启动子结合而抑制POLD1基因表达,且这种抑制作用不受细胞周期进程的影响．更多还原