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荧光MGB探针在Leber遗传性视神经病变mtDNA G11778A基因突变检测中的应用  
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【英文篇名】 Detection of mtDNA LHON G11778A mutation by real-time polymerase chain reaction using TaqMan-MGB probe technology
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【作者】 李毓敏; 王剑勇; 陈瑜; 邵俊斌; 王竞; 童绎;
【英文作者】 LI Yu-min; WANG Jian-yong; CHEN Yu; SHAO Jun-bin; WANG Jing; TONG Yi. Zheyi Eye Center; The First Affiliated Hospital; College of Medicine; Zhejiang University; Hangzhou 310003; China;
【作者单位】 浙江大学医学院附属第一医院浙益眼科中心; 浙江大学附属第一医院检验科; 杭州博康生物科技有限公司; 福建医科大学附属第一医院眼科;
【文献出处】 中华眼科杂志 , Chinese Journal of Ophthalmology, 编辑部邮箱 2006年 08期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 视神经萎缩; 遗传性; Leber; DNA; 线粒体; 突变; 核酸探针; 聚合酶链反应;
【英文关键词】 Optic atrophy; hereditary; Leber; DNA mitochondria; Mutation; Nucleic acid probes; Polymerase chain reaction;
【摘要】 目的建立一套快速、准确、简便筛查Leber遗传性视神经病变(LHON)mtDNA C11778A基因突变的新方法,并初步判断其异质性个体中野生和突变比例。方法采用荧光MGB探针实时聚合酶链反应(PCR)技术,在同一个反应体系中引入野生和突变型两种探针,应用多荧光通道PCR仪分别检测LHON家系中20例患者血样和17例正常人血样,将检测结果与核酸序列测定结果比较。结果正常人血样检测结果:荧光PCR技术检测VIC通道均为阳性,FAM通道均为阴性,判断为LHON mtDNA野生型,与测序结果完全吻合;临床LHON患者及家系成员测序结果:LHON mtDNA变异型患者12例,荧光PCR技术检测均为LHON mtDNA变异阳性,其中为LHON mtDNA变异株和野生株混合的5例,混合型中变异株与野生株Ct值均大于25%;测序结果显示LHON mtDNA野生型8例,荧光PCR技术检测LHON mtDNA野生型为5例,LHON mtDNA变异株和野生株混合型3例,其中变异株与野生株Ct值均小于25%;荧光定量PCR技术检测LHON mtDNA G11778A基因突变耗时仅为80 min,远短于测序时间。结论荧光MGB探针实...
【英文摘要】 Objective To develop a simple, rapid and reliable real-time PCR assay based on TaqMan technology using a new MCB probe for detecting mtDNA LHON G11778A mutation and heteroplasmy directly. Methods Twenty patients with suspicion of Leber hereditary optic neuropathy ( LHON) and their maternal relatives had undergone molecular genetic evaluation. Seventeen normal individuals were used as the controls. A real-time PCR involved two MCB probes (wild-type and mutation-type) in a single tube on the iCycler IQ real-t...
【更新日期】 2007-03-20
【分类号】 R774.6
【正文快照】 晚ber遗传性视神经病变(玩ber,shereditary optic neuropathy,LHON)是一种主要累及视网膜、巩膜筛板前部视乳头黄斑束纤维,导致视神经变性的临床常见遗传性疾病。本病临床表现为双眼急性或亚急性中心视野缺失,传递方式不符合孟德尔遗传规律。自Wallace在1988年首先研究发现

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