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结缔组织生长因子短发夹状RNA表达质粒的构建及其对肝星状细胞结缔组织生长因子表达的影响

Construction of CTGF shRNA expression vector and its effect on the expression or CTGF in rat hepatic stellate cells

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【作者】 主余年； 任万华； 张春清； 马艳丽； 石军； 赵幼安；

【Author】 ZHU Yu-hua；REN Wan-hua；ZHANG Chun-qing；MA Yun-li；SHI Jun ZHAO You-an Department of Gastroenterology, Shandong University Shandong Provincial Hospital, Jinan 250021, China

【机构】 山东大学山东省立医院消化内科； 山东大学齐鲁医院消化内科 济南 250021； 济南 250021；

【摘要】 <正>结缔组织生长因子(CTGF)是一种新发现的促成纤维细胞分裂和胶原沉积的生长因子,在肝纤维化形成中的作用逐渐受到关注。RNA干扰技术是目前最有效的基因沉默技术,能特异性抑制靶基因的转录,进而下调相应蛋白水平及功能。本研究将能在体内自主合成短发夹状RNA(shRNA)的pEGFP-CTGF表达质粒转入大鼠肝星状细胞(HSC-T6),观察其对CTGF mRNA及蛋白表达的影响。一、材料与方法 1．主要试剂：pEGFP质粒购自武汉晶赛生物公司；脂质体转染试剂盒Metafectene购自德国Biothex公司；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒购自日本TaKaRa公司；Trizol 试剂盒购自上海生工生物工程公司。小鼠单克隆β-肌动蛋白 (β-actin)第一抗体购自美国ABcam公司；羊抗CTGF多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司；兔抗小鼠-辣根过氧化物酶

【关键词】 生长物质； 肝星状细胞； RNA干扰；
【Key words】 Growth substances； Hepatic stellate cell； RNA interference；
【基金】 山东省卫生厅青年基金（2005年第25号）
  • 【文献出处】 中华肝脏病杂志 ,Chinese Journal of Hepatology , 编辑部邮箱 ,2006年03期
  • 【分类号】R575.2;R346
  • 【被引频次】2
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