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影响猪ICSI转基因技术效率的主要因素研究  
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【英文篇名】 Study on the Factors Affecting Transgenic Efficiency of Porcine by Intracytoplasmic Injection of Sperm
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 刘成军; 曾申明; 万鹏程; 郝泽东;
【英文作者】 LIU Cheng-jun; ZENG Shen-ming*; WAN Peng-cheng; HAO Ze-dong (College of Animal Science and Technology; China Agricultural University; Beijing 100094; China);
【作者单位】 中国农业大学动动物科技学院; 中国农业大学动动物科技学院 北京;
【文献出处】 中国畜牧杂志 , Chinese Journal of Animal Science, 编辑部邮箱 2006年 17期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 畜牧学; 转基因; 精子胞质内注射; 绿色荧光蛋白; 猪;
【英文关键词】 animal science; transgenesis; intracytoplasmic sperm injection; green fluorescence protein; pig;
【摘要】 以猪体外成熟卵子和冷冻解冻的死精子为材料,以pEGFP-N1为模式基因,探讨注射台温度、激活后6-DMAP的处理和精子与PEGFP-N1孵育液添加BSA(牛血清白蛋白)对精子胞质内注射(ICSI)转基因效率的影响。结果表明:注射台温度为30℃时的阳性率为40.07%,而38.5℃时为20.97%,差异极显著(P<0.01)。添加BSA的囊胚转基因率为55.56%,对照组为33.33%,差异极显著(P<0.01)。6-DMAP处理组与对照组的转基因率分别为52.53%和26.25%,差异极显著(P<0.01);而且6-DMAP处理组的囊胚率(9.96%)显著高于(P<0.05)对照组(2.30%)。研究表明注射台温度对转基因效率有明显影响,温度高转基因率低;精子与PEGFP-N1孵育液添加BSA对转基因胚胎发育有一定促进和保护作用,有利于提高囊胚转基因率;激活后用6-DMAP处理能提高转基因率和囊胚率。
【英文摘要】 In this study, we examined factors affecting transgenic efficiency of porcine using pEGFP-N1 by intracytoplasmic injection of sperm(ICSI), including injecting temperature, 6-DMAP and BSA. The sperm is dead,frozed-thawed without protection. The oocytes were matured in vitro and transgenic embryos were produced by ICSI. The rate of embryos expressing GFP at the injecting temperature of 30 ℃ is significantly different from that at 38.5 ℃(40.07% vs 20.97%, P < 0.01). Transgenic blastocyst rate is significantly ...
【基金】 国家自然科学基金(30571333)
【更新日期】 2006-10-13
【分类号】 S828
【正文快照】 猪的转基因技术研究具有重要的理论和商业价值。它能用来研究未知基因的功能和关键基因的表达调控特点;利用转基因技术提高猪的生产性能,培育新品种;转基因猪作为生物反应器,生产稀有的、具有生物活性的人类药用蛋白等等。精子胞质内注射(ICSI)转基因方法,最早是Perry等[1]提出

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