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一株无血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及其衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析

Isolation and Identification of a Non-haemagglutinating Strain of RHDV from China and Cloning and Sequence Analysis of VP60 Gene of the Strain

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【作者】 田浪王红宁李建文廖娟张夏兰周万蓉王鸿宾

【Author】 TIAN Lang~1,WANG Hong-ning~(1,2*),LI Jian-wen~1,LIAO Juan~1,ZHANG Xia-lan~1,ZHOU Wan-rong~1,WANG Hong-bin~1 (1.College of Animal Science and Technology,Sichuan Agricultural University, Yaan 625014,China;2.College of Life Scince,Sichuan University,Chengdu 610064,China)

【机构】 四川农业大学动物预防医学生物工程实验室四川农业大学动物预防医学生物工程实验室 雅安625014雅安625014四川大学生命科学学院成都610064

【摘要】 从临床病料中分离鉴定出1株无血凝性的致病性兔出血症病毒(RHDV),命名为Yaan-1。HA试验测得该毒株原代及经兔体传3代后的肝毒在25℃、37℃和4℃时均无血凝性;但在琼脂扩散试验和对流免疫电泳中均可见分离株与常规RHDV高免血清形成清晰的沉淀线;电镜观察可见30 nm左右的病毒粒子。采用RT-PCR方法将Yaan-1株的衣壳蛋白VP60基因进行了克隆测序,序列分析表明VP60基因序列全长1 740 bp,编码579个氨基酸,测序结果提交GenBank(注册号为DQ069280),并与世界各国的常规RHDV分离株进行比较,结果表明核苷酸同源性为90.0%~98.0%,氨基酸同源性为94.1%~99.0%,氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区;同时对Yaan-1株的分子量、等电点、疏水性、跨膜区等分子结构特征进行了分析。本研究首次报道了无血凝性RHDV中国分离株,丰富了地方毒株资源,为明确我国地方株的分子流行病学,以及对VP60蛋白分子特征研究提供了新材料。

【Abstract】 A variant strain of rabbit hemorrhagic disease virus which was named "Yaan-1" was(isolated) and identified in China.The virus lacked HA activity at 25,37 and 4 ℃,but gave positive results in agar diffusion reaction(ADR) and counter immunoelectrophoresis(CIE).The capsid protein(VP60)of Yaan-1 strain was cloned by RT-PCR and sequenced.VP60 gene of Yaan-1 was 1 740 nt in size and encoding 579 aa.Alignment with other 14 sequences of RHDV isolates in the world showed that the homology were 90.0%-98.0% for nucleotide sequence,and 94.1%-99.0%for amino acid sequence respectively.The results indicated that the sequence of VP60 gene of different RHDV isolates,including non-haemagglutinating Yaan-1 strain,were highly homologous.The hydrophilicity plot,flexible regions,antigenic index of VP60 protein of Yaan-1 strain,etc.were also analyzed.

【基金】 四川畜牧重点课题“川西长毛兔基地建设和疫病防治”
  • 【文献出处】 畜牧兽医学报 ,Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica , 编辑部邮箱 ,2006年10期
  • 【分类号】S852.65;Q78
  • 【被引频次】24
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