家蚕精子介导报告基因gfp和egfp转移技术的研究-中国学术期刊网络出版总库

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家蚕精子介导报告基因gfp和egfp转移技术的研究

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【英文篇名】	Sperm-mediated Repoter Gene gfp and egfp Transfer in the Silkworm
【下载频次】	★★★
【作者】	左正宏; 吴春旭; 桂慕燕; 陈元霖; 洪满贤;
【英文作者】	ZUO Zheng-hong; WU Chun-xu; GUI Mu-yan; CHEN Yuan-lin; HONG Man-xian(School of Life Sciences; Xiamen University; Xiamen 361005; China);
【作者单位】	厦门大学生命科学学院; 厦门大学生命科学学院福建厦门; 福建厦门;
【文献出处】	厦门大学学报(自然科学版) , Journal of Xiamen University(Natural Science), 编辑部邮箱 2006年 04期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊中国期刊方阵 CJFD收录刊
【中文关键词】	精子介导基因转移; 家蚕; 绿色荧光蛋白;
【英文关键词】	sperm-mediated gene transfer; silkworm; green fluorescence protein(GFP); enhance green gluorescence protein(EGFP);
【摘要】	探讨家蚕精子介导基因转移技术能否有效地将外源基因导入并整合到家蚕基因组中,使之稳定遗传.分别进行了含gfp报告基因的pG350载体和含egfp报告基因的pMD-Fib-IE-EGFP与pEGFP-N3载体的精子介导基因转移实验.结果表明,导入线性pG350载体,在14个G0代实验蛾区的DNA样品中,有5个PCR检测为阳性,阳性率为35.7%;对G1代的PCR与Southern blot检测的结果证明,导入的gfp基因存在于G1代的家蚕基因组中.导入不同浓度或构型的pMD-Fib-IE-EGFP与pEGFP-N3载体时,对G0代的PCR检测结果表明,导入线性pMD-Fib-IE-EGFP组的PCR阳性率为61.2%,而导入环状质粒组的PCR阳性率为57.1%;导入环状pEGFP-N3组的PCR阳性率为46.2%;对部分PCR阳性蛾区进行Southern blot检测结果表明,导入的egfp基因整合在G0代家蚕基因组中.本研究的结果表明,家蚕精子介导基因转移能够将外源基因有效地导入、整合于家蚕基因组,并可遗传至G1代.
【英文摘要】	In this study,the effiency of sperm-mediated gene transfer was analyzed for foreign gene introduced into and intergrated in the silkworm′s genome and inherited by the offspring.Different concentration or conformation vector DNA including gfp or egfp report gene were used in the gene transfer experiment on silkworm.The results showed that 5 DNA samples extracted from 14 G_(0)generation spawns were positive by PCR(positive proportion 35.7%) after introduction linearized pG350 with the concentration 2.0 mg/mL ...
【基金】	国家自然科学基金(39870410)资助
【更新日期】	2006-08-03
【分类号】	S881
【正文快照】	精子介导基因转移(sperm-mediated gene trans-fer,SMGT),即将精子与外源DNA共浴后再与卵子受精,由于精子细胞有结合外源DNA的能力,外源DNA就有可能通过受精过程进入受精卵并整合于受体基因组中.精子介导基因转移的操作简单,具有很好的物种适应性,因此,在Lavitrano等的小鼠精子

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