人肝癌细胞系H4M的建立及其遗传特征分析

【摘要】 目的采用原代细胞培养方法,在体外建立一株人肝癌细胞系H 4M,并对其遗传学特征进行分析。方法将分离的瘤细胞制成单细胞悬液,用含20%胎牛血清的DM EM培养液培养该细胞系,采用染色体G显带方法进行细胞遗传学分析,用对比基因杂交法分析肿瘤细胞基因组遗传学改变情况,并采用DNA-PCR方法检测等技术分析该细胞系周期素D 1扩增情况。结果染色体G带显示H 4M细胞为超3倍体,其中有一条染色体含有一长的同质染色区(hom ogeneously sta in ing reg ion,hsr)。比较基因组杂交(CGH)分析显示,H 4M的细胞遗传学改变为2,5,6p,7p,11p,13q21.3-qter增加,而11q13为高拷贝数扩增,8pter-p12,9,13q11-q21.2,16q,17pter-p12,19p和X pter-q13丢失。H 4M细胞系的CCND 1基因有明显的扩增。结论通过原代培养建立的肝癌细胞系H 4M与原发癌保持相同的生物学特性,体外连续传代60代以上,细胞形态不变,生长周期恒定,可望成为一个稳定的细胞系。更多还原