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人Neuritin在原核表达系统的构建及表达纯化

Expressing, Purification and Identification of Neuritin Gene in the E. coli

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【作者】 唐娟于娜吴亮生杨磊仙玲玲黄延红张树军黄瑾

【Author】 TANG Juan YU Na WU Liang-sheng YANG Lei XIAN Ling-ling HUANG Yan-hong ZHANG Shu-jun HUANG jin (Laboratory of Xingjiang Endemic and Ethnic Disease Shihezi 832002,China)

【机构】 石河子大学新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室石河子大学新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室 新疆 832002新疆 832002

【摘要】 Neuritin是一种新发现能促进神经突起和轴突分支的蛋白,为了更清楚的研究它的生物学功能,在已克隆Neuritin cDNA的基础上,PCR扩增出Neuritin ORF,与原核表达载体pET32a重组后,成功的构建了Neuritin原核表达质粒pET32a-Neuritin。重组质粒转化B121大肠杆菌,IPTG 诱导后,表达产物用SDS-PAGE和Western blot证实系Neuritin,用镍离子亲和层析的方法获得了纯化的Neuritin蛋白。

【Abstract】 Neuritin is a new neurotrophic factor found recently. In order to identify the function of Neuritin clearly, the coding sequence of human neuritin was amplified by PCR from neuritin cDNA , this fragment digested by NocI and NotI was inserted into pET32a by T4 ligase and transformed into E. coli BL21 then the recombinant plasmid named pET32a-neuritin was constructed successfully . Neuritin was expressed distinctly after inducing by EPTG. The product was identified as neuritin by SDS-PAGE and Western blot analysis . The expression production was purified on Ni2+-NTA column.

【基金】 国家自然科学基金资助项目(30260029);兵团博士基金项目:(No.04)
  • 【文献出处】 中国生物工程杂志 ,China Biotechnology , 编辑部邮箱 ,2006年04期
  • 【分类号】Q786
  • 【被引频次】14
  • 【下载频次】224
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